Princip činnosti laserového konfokálního mikroskopu
Princip činnosti laserového konfokálního mikroskopu
Laserový konfokální mikroskop Olympus je detektor, který dokáže zachytit signály. Jeho pracovní princip spočívá v tom, že bodový zdroj světla bude po průchodu fluorescenčním mikroskopem zobrazen jako zvětšená skvrna zvaná "Airy disk". Ve standardním interferometrickém konfokálním mikroskopu s bílým světlem je světlo vyzařované mimo ohniskovou rovinu blokováno dírkou, jejíž velikost určuje, jak velká část Airyho disku může vstoupit do detektoru. Čím menší je dírka, tím ostřejší je výsledný obraz a tím je obraz slabší, protože se ztrácí většina světla. Čím menší je dírka s aperturou, tím lepší je rozlišení, ale – opět – tím více se ztrácí světelný signál. Laserový konfokální mikroskop Olympus může poskytovat barevný CCD obraz a laserový skenovací konfokální obraz současně. Konfokální laserové mikroskopy Olympus jsou schopny měřit výšku pomocí konfokálního nastavení jednoho světelného zdroje, jednoho vzorku a jednoho detektoru. Když je vzorek umístěn v ohniskové rovině čočky objektivu a laserové světlo odražené od povrchu vzorku je zaostřeno do konfokální apertury, fotodetektor přijme signál ze vzorku. Když je vzorek v rozostřené poloze, konfokální apertura nepřijímá laserový signál, takže se shromažďuje pouze zaostřený signál. Tato funkce může realizovat funkci optického řezu laserového konfokálního mikroskopu Olympus.
Výhody konfokální laserové mikroskopie
1. Použitím laserového světla jako zdroje světla, po označení odpovídajících fluorescenčních sond, je vzorek skenován bod po bodu, aby se získaly dvojrozměrné optické obrazy průřezu vrstvu po vrstvě. Má funkci „buněčného CT“ a může být podporován počítačovým trojrozměrným rekonstrukčním softwarem pro získání trojrozměrných obrazů, které lze otáčet v libovolném úhlu pro pozorování trojrozměrného tvaru a prostorového vztahu buněk a tkání;
2. Dokáže pozorovat živé buňky a tkáně bez poškození a dynamicky měřit fyziologické informace živých buněk, jako je koncentrace Ca iontů a hodnota pH v buňkách;
3. Dokáže měřit tekutost buněčné membrány, mezibuněčnou komunikaci, buněčnou fúzi, elasticitu cytoskeletu atd. a lze jej použít jako „lehký nůž“ k dokončení intracelulární „chirurgie“. Tato technologie umožňuje in situ dynamické a kvantitativní pozorování a měření živých buněk a tkání.
