Vzpřímený biofluorescenční mikroskop
Principem fluorescenční mikroskopie je použití vysoce účinného bodového světelného zdroje (jako je ultra vysokou tlakovou rtuťovou lampu) k emitování určité vlnové délky světla (jako je ultrafialové světlo 3650 λ nebo fialové modré světlo 4200 λ) prostřednictvím excitačního světla jako excitační světlo, které jako excitační světlo, které vzrušuje fluorescenční látky ve vzorku emitujícím barevům. Poté se filtruje blokováním (nebo potlačujícím) filtrem za objektivnou čočkou a pozoruje se prostřednictvím zvětšovacího účinku okuláru.
Filtr blokování má dvě funkce: zaprvé absorbuje a blokuje excitační světlo v vstupu do okuláru, aby se zabránilo narušení fluorescence a poškození očí; Druhým je výběr a umožnění projít konkrétní fluorescence a vykazovat konkrétní zářivkovou barvu.
Fluorescenční mikroskopy lze rozdělit do dvou typů na základě principu světelné cesty:
1. Fluorescenční mikroskop přenosu
Starší fluorescenční mikroskopy používají reflektor k exciaci fluorescence prodáním zdroje excitačního světla prostřednictvím materiálu vzorku. Jeho výhodou je silná fluorescence při nízkém zvětšení, ale jeho nevýhodou je, že její fluorescence klesá se zvyšujícím se zvětšením. Je tedy vhodný pouze pro pozorování větších materiálů vzorku.
2. Fluorescenční mikroskop padajícího světla
Excitační světlo padá z objektivu objektivu na povrch vzorku a používá stejný objektiv jako kondenzátor osvětlení a objektiv pro sběr fluorescence.
K optické cestě je třeba přidat duální barevný paprsek (dichroické zrcadlo), která tvoří úhel 45 stupňů s optickou osou. Excitační světlo se odráží do objektivu objektivu a zaměřuje se na vzorek. Fluorescence generovaná vzorkem, jakož i excitační světlo odrážející z povrchu objektivu a krycího skla, vstoupí do objektivu objektivu současně a vraťte se k rozdělení duálního barevného paprsku, aby se oddělil excitační světlo a fluorescenci. Zbytkové excitační světlo je poté blokováno absorpcí filtru. Pokud se používají různé kombinace excitačních filtrů, separátorů dvojitého barevného paprsku a blokovacích filtrů, mohou splňovat potřeby různých fluorescenčních reakčních produktů.
Výhodou tohoto fluorescenčního mikroskopu jsou jednotné osvětlení pole, jasné zobrazování a silnější fluorescence s větším zvětšením.
