Hlavní parametry čočky objektivu optického mikroskopu
Hlavní parametry objektivu jsou:
Mezi hlavní parametry čočky objektivu patří zvětšení, numerická apertura a pracovní vzdálenost.
① Zvětšení označuje poměr velikosti obrazu viděného okem k velikosti odpovídajícího vzorku. Odkazuje na poměr délky spíše než na poměr plochy. Příklad: Faktor zvětšení 100 ×, Vztahuje se na délku 1 μ. Délka zvětšeného vzorku m je 100 μm. Pokud se počítá podle plochy, je zvětšena 10 000krát.
Celkové zvětšení mikroskopu se rovná součinu zvětšení objektivu a okuláru.
② Číselná apertura, známá také jako aperturní poměr, zkráceně NA nebo A, je hlavním parametrem čočky objektivu a kondenzoru a je přímo úměrná rozlišení mikroskopu. Numerická apertura suchého objektivu je 0.05-0.95 a numerická apertura objektivu ponořeného do oleje (cedrový olej) je 1,25.
optický mikroskop
③ Pracovní vzdálenost se týká vzdálenosti od přední čočky objektivu ke krycímu sklu preparátu, kdy je pozorovaný preparát nejčistší. Pracovní vzdálenost čočky objektivu souvisí s její ohniskovou vzdáleností. Čím delší je ohnisková vzdálenost čočky objektivu, tím menší je zvětšení a delší pracovní vzdálenost. Příklad: Objektiv 10x je označen 10/0.25 a 160/0.17, kde 10 je zvětšení cíl; 0,25 je numerická apertura; 160 je délka tubusu objektivu (v mm); 0,17 je standardní tloušťka krycího skla v milimetrech. Efektivní pracovní vzdálenost objektivu 10x je 6,5 mm a efektivní pracovní vzdálenost objektivu 40x je 0,48 mm.
Proč používat olejové zrcadlo k dosažení nejvyššího rozlišení v optické mikroskopii
Olejové zrcadlo, jeden z optických mikroskopů, se používá, když je čočka ponořena do oleje (obvykle cedrového oleje) k pozorování jemnějších struktur. Je to jeden z běžně používaných mikroskopů v laboratoři, s mírně vyšší jasností než běžné optické mikroskopy a používá se k pozorování chlamydií, bakterií, organel atd.
Čočka olejové čočky je velmi malá. Když světlo prochází vzduchem mezi skleněným sklíčkem a olejovou čočkou, dochází v důsledku různých hustot média k lomu nebo totálnímu odrazu, což snižuje množství světla vstupujícího do čočky a rozmazává obraz. Pokud se mezi olejovou čočku a podložní sklíčko přidá cedrový olej (n=1.515) s indexem lomu podobným indexu lomu skla (n=1.52), množství světla vstupující do objektivu se zvětší, jas zorného pole se zvýší a obraz bude jasný a jasný
Vzhledem k malé velikosti bakterií je při studiu bakteriální morfologie často nutné použít mikroskopické olejové zrcátko k jejich jasnému pozorování. Proto je nutné dokonale ovládat použití a způsoby ochrany olejových zrcadel
