Vztah mezi celkovým zvětšením a rozlišením v mikroskopii ponoření ropy
Cíle mikroskopů použitých v mikrobiologickém výzkumu jsou obvykle tři typy: nízké zvětšení (1 {{2 0} x), vysoké zvětšení (4 0 x) a zvětšení oleje (100x). Existuje také slovo „oi“ (olejové ponoření), které naznačuje, že má nejvyšší zvětšení mezi těmito třemi. V závislosti na zvětšení použitého okuláru lze zkontrolovat objekt 1000-1600 časy. Při používání je rozdíl mezi olejovým ponořovacím čočkou a dalšími cíli, že mezi sklíčka ze skleněného skluzu a objektivem neexistuje vrstva vzduchu, ale vrstva oleje zvanou olejový ponoření. Tento typ oleje je často vybírán jako cedrwoodský olej, protože jeho index lomu n =1. 52, který je stejný jako sklo. Když světlo prochází sklíčkem skleněného skluzu, může přímo vstoupit do objektivu objektivu přes cedrový olej bez lomu. Pokud je médium mezi sklíčkem ze skleněného skluzu a objektivem objektivu vzduchem, nazývá se suchý systém. Když světlo prochází sklíčkem sklíčka, je lomenově a rozptýleno a množství světla vstupujícího do objektivu je zjevně sníženo, což snižuje osvětlení zorného pole. Použití olejových zrcátek nejen zvyšuje osvětlení, ale také primárně zvyšuje numerickou aperturu, protože účinnost zvětšení mikroskopu je stanovena jeho numerickým aperturou. Takzvaná numerická clona se týká produktu poloviny sinusového maximálního úhlu, při kterém se promítne světlo na objektivu objektivu (známé jako úhel čočky) vynásobeným indexem lomu mezi sklíčkami a objektivní čočkou. Může být vyjádřen následujícím vzorcem: Na=n × sin а, kde na=numerická aperture; N=index refrakčního indexu média; A=Polovina maximálního úhlu dopadu, tj. Polovina úhlu zrcadla. Čím větší je tedy úhel, při kterém se světlo promítá na objektiv objektivu, tím větší je účinnost mikroskopu a velikost tohoto úhlu závisí na průměru a ohniskové vzdálenosti objektivu. Mezitím je teoretický limit A 90 .. Sin90. Pokud je dopadající úhel světla 120o a polovina jeho sine je sinus sin60o =0. při použití vody jako média: na =1. 33 × 0. 87=1. 15; Při použití asfaltu jako média: na =1. 52 × 0. 87=1. 32. Rozlišení mikroskopu odkazuje na jeho schopnost rozlišit minimální vzdálenost mezi dvěma body. Je přímo úměrný numerickému otvoru objektivu objektivu a nepřímo úměrné délce vlnové délky. Čím větší je tedy numerická apertura objektivu objektivu, tím kratší je vlnová délka světelné vlny, tím větší je rozlišení mikroskopu a tím jasnější je jemná struktura zkontrolovaného objektu rozlišit.
Čím větší je tedy numerická apertura objektivu objektivu, tím kratší je vlnová délka světelné vlny, tím větší je rozlišení mikroskopu a tím jasnější je jemná struktura zkontrolovaného objektu rozlišit. Vysoký rozlišení tedy znamená malou odlišeninou vzdálenost a tyto dva faktory jsou nepřímo proporcionální. Někteří lidé obvykle popisují rozlišení jako kolik mikrometrů nebo nanometrů je, což ve skutečnosti zaměňuje rozlišení s vzdáleností minimálního rozlišení. Rozlišení mikroskopu je reprezentováno minimální vzdáleností, kterou lze vyřešit. Minimální vzdálenost, která může rozlišovat mezi dvěma body, je λ/2NA, kde λ=vlnová délka světelné vlny. Průměrná délka světelné vlny, kterou lze vnímat pouhým okem, je 0. 55 μm. Pokud je numerická clona 0. 65 pro objektiv s vysokým výkonem, může rozlišovat vzdálenost mezi dvěma body jako 0. 42 μm. Vzdálenost mezi dvěma body pod 0. 42 μm však nelze rozlišit, i když se ke zvýšení celkového zvětšení mikroskopu použije větší zvětšovací okulátor. Pouze použitím větší objektiv objektivu s větším číselným otvorem lze zvýšit jeho rozlišení. Například při použití olejového zrcadla s numerickým otvorem 1,25 je minimální vzdálenost mezi dvěma body, které lze rozlišit, 0. 55/(2 × 1,25) =0 22 μm. Můžeme tedy vidět, že pokud se objektiv objektivu s vysokým výkonem se zvětšením 4 0 časů (na =0. 65) používá okulár s zvětšením 24krát, i když celkové zvětšení je 96 0 krát, je vzdálenost minimálního rozlišení pouze 0,42 μm. Pokud se používá olejové zrcadlo s zvětšením 90krát (Na =1. 25) a okulár se zvětšením 9krát, ačkoli celkové zvětšení je 810krát, lze odlišit vzdálenost 0,22 μm.
