Principy mikroskopických mikrometrů pro stanovení velikosti buněk
Princip stanovení velikosti mikrobiálních buněk pomocí mikroskopického mikrometru
Velikost mikrobiálních buněk je jedním z důležitých podkladů pro mikrobiální klasifikaci a identifikaci. Mikroorganismy jsou maličké a musí
Je třeba ji pozorovat pomocí mikroskopu a pro měření velikosti mikrobiálních buněk je nutné ji měřit i pod mikroskopem pomocí speciálního mikrometru.
Mikrometr se skládá ze dvou částí: stolového mikrometru a okulárového mikrometru.
Jevištní mikrometr je kus skla s vyrytým středem (obr. 2-7), celková délka stupnice je l mm, rozdělená na 100 malých dílků, každý dílek je dlouhý 10 μm,
Věnováno kalibraci okulárových mikrometrů. Mikrometr okuláru lze přímo použít k měření velikosti buňky, jedná se o kruhové sklíčko (obr.
Při měření jej umístěte na přepážku v okuláru. Celková délka stupnice okulárového mikrometru je l cm, rozdělená na 100 malých dílků a každý dílek je dlouhý 100 μm.
Protože okulárový mikrometr měří velikost obrazu mikrobiální buňky poté, co byla zvětšena mikroskopem, skutečná délka reprezentovaná stupnicí se mění v závislosti na zvětšení použitého okuláru a čočky objektivu a velikosti tubusu čočky.
Před použitím je proto nutné jej zkalibrovat stolním mikrometrem, aby se zjistila délka reprezentovaná každou malou mřížkou okulárového mikrometru při určitém zvětšení, a poté pomocí okulárového mikrometru přímo změřit velikost měřeného objektu.
Výpočet korekčního faktoru stupnice mikrometru okuláru (kalibrační faktor): stupnice mikrometru okuláru
(μ=známá vzdálenost mezi dvěma překrývajícími se ryskami na stolním mikrometru / dvěma překrývajícími se ryskami m) stupnice mikrometru okuláru
Příklad 1: Pokud je známá vzdálenost mezi dvěma překrývajícími se čarami 2 stupňové mikrometrické stupnice (2 X 10 μ
m), což odpovídá 13 mikrometrickým stupnicím okuláru, pak korekční faktor každé mikrometrické stupnice okuláru=20 μm / 13=1,54 μm
Příklad 2: Pokud je mikroorganismus pozorován mikrometrem okuláru mikroskopu a délka je 5 mikrometrických stupnic okuláru, pak
Délka mikrobu=počet dílků mikrometru okuláru X korekční faktor pro každý dílek mikrometru okuláru=5 X 1,54 μm=7,70 μm
