Princip a funkce mikroskopu v temném poli
① Mikroskop v tmavém poli má ve středu kondenzoru neprůhlednou zarážku. Zabraňuje přímému pronikání světla do čočky objektivu; shromažďuje se pouze světlo odražené a ohýbané vzorkem. V důsledku toho se pozadí zorného pole jeví jako tmavé, zatímco okraje preparátu jsou světlé. Tento mikroskop dokáže odhalit jemné částice o velikosti 4–200 nm s rozlišením až 50krát vyšším než u běžného mikroskopu ve světlém poli.
② Princip Mikroskop v tmavém poli je modifikován z konvenčního optického mikroskopu na základě Tyndallova jevu. Kondenzátor tmavého pole blokuje centrální paprsek ze zdroje světla, takže světlo nemůže procházet preparátem přímo nahoru do objektivu. Místo toho je světlo odkloněno tak, aby osvětlovalo vzorek šikmo. Vzorek odráží nebo rozptyluje dopadající světlo a rozptýlené světlo vstupuje do objektivu a vytváří tmavé pozadí v celém zorném poli.
③ Rozsah použití Mikroskopie v tmavém poli se běžně používá pro pozorování neobarvených průhledných vzorků. Takové vzorky mají index lomu blízký indexu lomu okolního prostředí a je obtížné je rozlišit při běžném osvětlení jasným polem. Osvětlení tmavého pole zlepšuje kontrast mezi preparátem a pozadím. Dokáže detekovat částice až do 4–200 nm. Zobrazuje však pouze přítomnost, pohyb a povrchové rysy objektů a nedokáže vyřešit jejich jemné vnitřní struktury.
④ Provozní postupy
(1) Namontujte kondenzor pro tmavé pole na držák kondenzoru mikroskopu.
(2) Použijte zdroj jasného světla. Vyhněte se přímému pronikání světla do objektivu; obecně se používá specializovaná mikroskopická lampa.
(3) Umístěte kapku cedrového oleje mezi kondenzátor a podložní sklíčko. Tím se zabrání úplnému vnitřnímu odrazu světla na povrchu kondenzoru, který by jinak neosvětlil preparát pro pozorování v tmavém poli.
(4) Zvedněte nebo spusťte kondenzor, aby se jeho kuželový světelný paprsek zaostřil na vzorek. Pokud je kondenzor vybaven ovládacími prvky horizontálního pohybu a centrování, proveďte nejprve centrování, aby se optická osa kondenzoru přesně vyrovnala s osou mikroskopu. (5) Vyberte objektiv odpovídající kondenzoru, upravte zaostření a zobrazte obraz cílového vzorku.
