Obecné technické parametry mikroskopu a vlastní podstatná jména
Numerická apertura NA
Číselná apertura NA označuje index lomu (η) média mezi přední čočkou objektivu a vzorkem vynásobený polovinou aperturního úhlu (u). Vztah je NA=η·sinu/2. Je to hlavní technický parametr čočky objektivu a kondenzorové čočky. Důležitý ukazatel pro posouzení výkonu čočky objektivu je vyznačen na krytu čočky objektivu.
Čím větší je numerická apertura, tím lepší je kvalita obrazu. Úhel clony nelze změnit při pozorování čočky objektivu a NA lze změnit změnou indexu lomu různých médií. Proto odvozené objektivy s vodní imerzí, čočky s olejovou imerzí. Voda η{0}}.333, NA čočky ponořené do vody může být 0.1~1.25; cedrový olej η=1.515, olejová imerzní čočka objektivu NA může být 0,80~1,45; nový prstencový bromonaftalen η=1.66, čočka objektivu NA Větší nebo rovno 1,40.
Numerická clona je přímo úměrná rozlišení, zvětšení a jasu obrazu a nepřímo úměrná hloubce ostrosti. Jak se NA zvětšuje, úměrně se zmenšuje šířka zorného pole a pracovní vzdálenost.
rozlišení
Rozlišení označuje minimální vzdálenost rozlišení, při které světelné skvrny vykazují rozdíly v procesu zobrazování, vyjádřenou jako d{0}}λ/NA, kde d je minimální vzdálenost rozlišení, λ je vlnová délka vlákna, a NA je numerická apertura čočky objektivu. Je vidět, že čím větší NA, tím kratší λ, menší d a tím vyšší rozlišení. Zdroje viditelného světla mohou rozlišit pouze dva body objektu ve vzdálenosti 0,4 μm.
Zlepšení rozlišení závisí na 4 souvisejících faktorech: 1. Při použití světelného zdroje s kratší vlnovou délkou λ klesá; 2. Při použití média s vyšším indexem lomu se η zvyšuje a NA se zvyšuje; 3. Navrhněte a vyrobte větší úhel clony objektivu; 4. Zvyšte kontrast světlého a tmavého obrazu a zlepšete jeho čistotu.
získat
hloubka ostrosti
Odkazuje na hloubku ohniska, to znamená intervalový rozsah nad a pod ohniskovou rovinou vzorku, který je také jasně pozorován. Čím větší je hloubka ostrosti, tím více vrstev vzorku bude zaostřeno.
① Hloubka ostrosti je nepřímo úměrná celkovému zvětšení, numerické apertuře objektivu a rozlišení obrazu. Čím větší zvětšení, tím větší hodnota NA, menší hloubka ostrosti a vyšší rozlišení.
②Index lomu okolního média, jako je montážní činidlo připravené vzorkem, se zvyšuje a hloubka ostrosti se zvětšuje.
Šířka zorného pole
Odkazuje na skutečný rozsah vzorku obsaženého v kruhovém zorném poli mikroskopu, také známý jako průměr zorného pole. Čím větší je, tím větší je množství ukázkových informací.
①Šířka zorného pole je úměrná počtu zorných polí okuláru. Pokud je zvětšení okuláru konstantní, čím větší je počet zorných polí, tím větší je šířka zorného pole, což je vhodné pro pozorování (Poznámka: počet zorných polí se vztahuje k šířce zorného pole pohled na okulár vyjádřený FN a vyznačený na vnějším plášti okuláru). ②Zvětšení čočky objektivu se zvětší a šířka zorného pole se zmenší. To znamená, že pod objektivem s nízkým výkonem je vidět celý obrázek a pod objektivem s vysokým výkonem je vidět část.
špatné pokrytí
Mezinárodní standard pro tloušťku krycího skla vzorků je 0,17 mm. Čočka objektivu byla korigována na tento fázový rozdíl a označena na krytu. Když světlo prochází krycím sklem nestandardní tloušťky a vstupuje do vzduchu, dochází k lomu a způsobený fázový rozdíl se nazývá rozdíl pokrytí.
Špatné pokrytí ovlivňuje kvalitu mikroskopického zobrazení. Při pozorování vzorků musíte pochopit následující tři body:
(1) Čím vyšší je zvětšení, tím větší je hodnota NA a tím zřetelnější je rozdíl v pokrytí. S rostoucí tloušťkou krycího sklíčka se zvyšuje slabé pokrytí a zaostřování je obtížné.
(2) Čočka objektivu s olejovou imerzí nemá problém se špatným pokrytím, protože index lomu oleje a krycího skla jsou oba 1,52 a tvoří jednotný optický systém.
(3) Čím větší je hodnota NA objektivu, tím menší je dovolená chyba tloušťky krycího skla a tím přísnější jsou požadavky na kvalitu tloušťky krycího skla.
pracovní vzdálenost
Vztahuje se na vzdálenost mezi předním povrchem čočky objektivu a vzorkem, také známou jako vzdálenost objektu. Při pozorování by měl být vzorek v 1~2 ohniskové vzdálenosti čočky objektivu. Ono a ohnisková vzdálenost jsou dva pojmy. Zaostření mikroskopu je vlastně nastavením pracovní vzdálenosti.
Když je numerická apertura (NA) čočky objektivu konstantní, pokud se zkrátí pracovní vzdálenost, je třeba zvětšit úhel clony. NA objektivu s velkým zvětšením je velká a pracovní vzdálenost se zmenší.
Jas zrcadla vs jas pole
(1) Jas zrcadlového obrazu je jas obrazu, který udává jas a tmavost obrazu pozorovaného očima a je požadováno, aby nebyl matný, oslňující nebo unavený.
(2) Jas zorného pole je světlost a tmavost zorného pole pod mikroskopem, která je ovlivněna různými faktory, jako je čočka objektivu, okulár a intenzita světelného zdroje.
Existují dva hlavní body týkající se vztahu mezi jasem zrcadla a dalšími technickými parametry mikroskopu.
(1) Jas zrcadlového obrazu je úměrný druhé mocnině numerické apertury (NA). Za stejných podmínek se výrazně zlepší světelnost objektivu s velkým NA.
(2) Jas zrcadlového obrazu je nepřímo úměrný druhé mocnině celkového zvětšení. Za stejných podmínek se zvětšení okuláru zvětší a jas zrcadlového obrazu se sníží.
