Úvod do principů fluorescenční mikroskopie
1, fluorescenční mikroskop používá jako zdroj světla ultrafialové světlo, které se používá k ozařování zkoumaného předmětu tak, aby vyzařoval fluorescenci, a pak pozoruje tvar předmětu a jeho umístění pod mikroskopem. Fluorescenční mikroskop se používá ke studiu příjmu a transportu látek v buňce, distribuce a lokalizace chemických látek atd. Některé látky v buňce, např. chlorofyl, lze nalézt v buňce. Některé látky v buňce, jako je chlorofyl, mohou po ozáření ultrafialovým světlem fluoreskovat; existují látky, které samy o sobě fluoreskovat nedokážou, ale pokud jsou obarveny fluorescenčními barvivy nebo fluorescenčními protilátkami, mohou fluoreskovat i po ozáření ultrafialovým světlem a fluorescenční mikroskop je jedním z nástrojů pro kvalitativní a kvantitativní výzkum takových látek.
2, Princip fluorescenčního mikroskopu:
(A) světelný zdroj: světelný zdroj vyzařuje různé vlnové délky světla (od ultrafialového po infračervené).
(B) zdroj excitačního filtru: přes vzorek může produkovat fluorescenci o specifické vlnové délce světla, a přitom blokovat excitaci fluorescence zbytečného světla.
(C) Fluorescenční vzorek: obecně obarvený fluorochromem.
(D) Blokovací filtry: blokují excitační světlo, které není absorbováno vzorkem, aby selektivně propouštělo fluorescenci, a některé vlnové délky ve fluorescenci jsou také selektivně přenášeny.
Mikroskop, který využívá ultrafialové světlo jako zdroj světla k tomu, aby ozařovaný objekt fluoreskoval. Elektronový mikroskop byl poprvé sestaven v roce 1931 v Berlíně v Německu firmou Knorr a Haroska. Tento mikroskop používá vysokorychlostní elektronový paprsek místo světelného paprsku. Protože vlnová délka proudu elektronů je mnohem kratší než světelná vlna, může zvětšení elektronového mikroskopu dosáhnout 800,000násobku, minimální hranice rozlišení je 0,2 nm. 1963 začal používat rastrovací elektronový mikroskop, díky kterému lidé viděli povrch drobné struktury objektu.
3, rozsah použití: používá se ke zvětšení obrazu malých objektů. Obecně se používá v biologii, medicíně, mikroskopických částicích a dalších pozorováních.
