Úvod do obecných optických mikroskopů
Mikroskop je primární nástroj pro pozorování buněk. Podle různých zdrojů světla je lze rozdělit do dvou kategorií: optické mikroskopy a elektronové mikroskopy. První používá viditelné světlo (UV mikroskop používá ultrafialové světlo) jako zdroj světla, zatímco druhý používá jako zdroj světla elektronový paprsek. Běžné optické mikroskopy a laserové konfokální mikroskopy jsou oba optické mikroskopy.
Běžné biologické mikroskopy se skládají ze tří částí, a to: ① osvětlovací systém včetně světelného zdroje a kondenzoru; ② optický zvětšovací systém sestávající z objektivu a okuláru, který je hlavním tělem mikroskopu. Aby se eliminovala sférická a chromatická aberace, jsou jak okulár, tak čočka objektivu složeny z komplexu Složeného ze skupiny čoček; ③ mechanické zařízení, používané k fixaci materiálů a usnadnění pozorování.
Zda je obraz mikroskopu čistý, závisí nejen na zvětšení, ale také na rozlišení mikroskopu. Rozlišení označuje schopnost mikroskopu (nebo lidského oka vzdáleného 25 cm od cíle) rozlišit nejmenší vzdálenost mezi objekty. Velikost rozlišení určuje Na základě vlnové délky světla, poměru otevření čočky a indexu lomu média je vzorec vyjádřen jako:
R=0.61λ/NANA =ｎsin /2
Ve vzorci: n=index lomu média; =úhel zrcadlové apertury (úhel otevření preparátu vůči apertuře objektivu), NA=numerická apertura. Úhel zrcadla je vždy menší než 180 stupňů, takže maximální hodnota sina/2 musí být menší než 1.
Index lomu skla používaného k výrobě optických čoček je 1,65~1,78. Čím blíže je index lomu použitého média indexu lomu skla, tím lépe. U suchých čoček objektivů je médiem vzduch a poměr otevření čočky je obecně 0.05~0,95; u olejových čoček se jako médium používá cedrový olej a poměr otevření čočky se může blížit 1,5.
Vlnová délka běžného světla je 400~700nm, takže hodnota rozlišení mikroskopu nebude menší než 0,2μm. Rozlišení lidského oka je 0,2 mm, takže maximální zvětšení obecné konstrukce mikroskopu je obvykle 1000X.
