Fluorescenční mikroskop používá metody a preventivní opatření
Způsob použití:
(1) Umístěte materiálový list na nosič.
(2)Zapněte regulátor napětí fluorescenčního mikroskopu. Poté stiskněte startovací skupinu pro zapálení, UV lampa se nesmí vypínat po dobu 15 minut a nesmí být restartována po dobu 3 minut po jejím vypnutí.
(3)Otočte excitační filtr na v, dichroický film na v, zvolte blokovací filtr 495 nebo 475nm.
(4) Zvolte fluorescenční mikroskopii uvFL40, uvFL100 s objektivem.
(5) Přidejte nefluorescenční olej na sklíčko, nejprve 40x a poté 100x zaostřovací mikroskopii. Zobrazit fluorescenci.
(7) Protože fluorescenční materiál ultrafialovým zářením s růstem fluorescence v průběhu času postupně slábne, je třeba při mikroskopickém vyšetření často měnit zorné pole.
(8) lze také použít mikroskopický materiál uvFL10 nebo uvFL20 s malým zvětšením (s malým zvětšením bez přidání nefluorescenčního oleje).
Metoda záznamu fluorescenčního obrazu:
Fluorescenční obraz viděný fluorescenčním mikroskopem, jeden je s morfologickými charakteristikami, druhý je s barvou a jasem fluorescence, při posuzování výsledků je třeba tyto dva kombinovat s komplexním posouzením. Výsledky jsou zaznamenávány podle subjektivních ukazatelů, tj. vizuálním pozorováním pracovníka. Jako obecné kvalitativní pozorování v zásadě spolehlivé. S rozvojem technologie a vědy se v různé míře začalo používat objektivní indikátory k zaznamenání výsledků úsudku, jako je použití buněčného spektrofotometru, analyzátoru obrazu a dalších přístrojů. Výsledky zaznamenané těmito přístroji však musí být také kombinovány se subjektivním úsudkem.
Technologie fluorescenčního mikroskopu je velmi nezbytná pro záznam fluorescenčních snímků, protože fluorescence snadno slábne a zeslabuje, aby se okamžitě zaznamenaly výsledky fotografie. Metoda je v podstatě stejná jako běžná mikrofotografie. Stačí použít vysokorychlostní fotografický film, jako je ASA200 výše nebo 24. výše. Protože ultrafialové světlo na fluorescenční burst efekt, jako jsou FITC markery, při ozařování ultrafialovým světlem 30 s, fluorescenční jas se snížil o 50 %. Rychlost expozice je proto příliš pomalá pro zachycení fluorescenčního obrazu. Všeobecné výzkumné fluorescenční mikroskopy mají poloautomatická nebo plně automatická mikrofotografická systémová zařízení.
Opatření:
(1) Pracujte v přísném souladu s požadavky tovární příručky fluorescenčního mikroskopu, neměňte postup svévolně.
(2) Kontrola by měla být provedena v temné komoře. Po vstupu do temné komory připojte napájení, rozsviťte ultravysokotlakou rtuťovou výbojku po dobu 5-15min, počkejte, až se světelný zdroj vyšle silné světlo, aby se stabilizoval a oči se zcela přizpůsobily temné komoře a pak začněte pozorovat vzorek.
(3) Aby se zabránilo poškození očí ultrafialovým světlem, měli byste při nastavování zdroje světla nosit ochranné brýle.
(4) zkontrolujte čas pokaždé, když je vhodná doba 1 ~ 2 h, více než 90 minut, svítivost ultra-vysokotlaké rtuťové lampy se postupně snižuje, fluorescence slábne; vzorky ozářeny ultrafialovým světlem 3 ~ 5min, fluorescence je také výrazně oslabena; proto * nesmí být delší než 2 ~ 3 h.
(5) Životnost světelného zdroje fluorescenčního mikroskopu je omezená, vzorek by měl být centralizován, aby se ušetřil čas a chránil zdroj světla. Když je horká, je třeba přidat chlazení ventilátorem, nová žárovka by měla být zaznamenána od začátku používání času. Když lampa zhasne a chce být znovu použita, musí být žárovka před rozsvícením dostatečně ochlazena. Zdroji světla je třeba se několikrát vyhnout.
(6) Pozorujte vzorek ihned po obarvení, protože fluorescence se bude časem postupně snižovat. Pokud je vzorek umístěn v polyethylenovém plastovém sáčku skladovaném při 4 stupních, může oddálit dobu zeslabení fluorescence a zabránit odpařování těsnicího prostředku.
(7) Kritéria posuzování pro jas fluorescence: obecně rozděleno do čtyř úrovní, tj. „jedna“ – žádná nebo viditelná slabá fluorescence. '+' - pouze jasně viditelná fluorescence. '+ +' - viditelné s jasným světlem
