Tipy a triky pro fluorescenční mikroskop

Apr 17, 2024

Zanechat vzkaz

Tipy a triky pro fluorescenční mikroskop

 

(i) Sklíčka
Tloušťka podložního sklíčka by měla být mezi 0,8 a 1,2 mm, příliš silné sklony, na jednu stranu větší absorpce světla, na druhou stranu nemůže způsobit excitaci světla v nashromážděném vzorku. Sklíčko musí být hladké, jednotné tloušťky, bez zjevné autofluorescence. Někdy jsou vyžadována sklíčka z křemenného skla.


(ii) Krycí sklíčka
Tloušťka krycího sklíčka asi 0,17 mm, čisté. Za účelem zesílení excitačního světla lze také použít k interferenci s krycím sklíčkem, což je speciální povrch pokovený řadou vrstev různých vlnových délek světla, které hrají různou roli při interferenci látek (např. fluoridu hořečnatého). krycí sklíčko, které může způsobit fluorescenci prostřednictvím hladké a reflexní excitace světla, odražená excitace světla může být excitací vzorku ženy.


iii) vzorky
Tkáňové řezy nebo jiné preparáty nemohou být příliš silné, např. příliš silné excitační světlo se většinou spotřebovává ve spodní části preparátu a čočka objektivu přímo pozoruje v horní části nedostatečné buzení. Navíc překrývání buněk nebo maskování nečistot ovlivňující úsudek.


(D) těsnicí prostředek
Těsnicí prostředek běžně používaný glycerol, musí být bez autofluorescence, bezbarvý a průhledný, jas fluorescence v pH 8,5 ~ 9,5 je jasnější, není snadné rychle vyblednout. Proto běžně používaný glycerin a 0,5mol/lpH9.0 ~ 9,5 karbonátového pufru stejné množství směsi pro těsnicí prostředek.


(E) zrcadlový olej
Obecný fluorescenční mikroskop v tmavém poli a pozorování vzorků olejových zrcadel, musí být použit zrcadlový olej, nejlépe s použitím speciálního nefluorescenčního zrcadlového oleje, lze také použít místo výše uvedeného glycerolu, lze použít i tekutý parafín, ale index lomu nižší, což mírně ovlivňuje kvalitu obrazu.

 

2 Electronic Microscope

Odeslat dotaz