Základní operace fluorescenčního mikroskopu
A. Vypněte světla v místnosti a zapněte rtuťovou lampu mikroskopu;
b. Vyberte odpovídající filtr podle fluoresceinu označeného vzorkem;
C. Umístěte vzorek a najděte vhodné zorné pole;
d. Pokud potřebujete fotografovat, potvrďte, že je ve fotoaparátu nainstalován barevný film;
E. Zapněte zařízení Selfie, zvolte manuální rychlostní stupeň, obvykle je rychlost snímání do 0.5-10 sekund;
F. Po použití vypněte veškeré napájení a poznamenejte si používání. a
a
3. Metoda záznamu fluorescenčního obrazu
Fluorescenční obraz viděný fluorescenčním mikroskopem má jak morfologické charakteristiky, tak fluorescenční barvu a jas. Při posuzování výsledků je třeba tyto dva spojit pro komplexní posouzení. Výsledky jsou zaznamenávány na základě subjektivních ukazatelů, tedy vizuálního pozorování pracovníky. Jako obecné kvalitativní pozorování v zásadě spolehlivé. S rozvojem technologie a vědy se k zaznamenání výsledků úsudku v různé míře používají objektivní indikátory, jako jsou buněčné spektrofotometry, analyzátory obrazu a další přístroje. Výsledky zaznamenané těmito nástroji však musí být také kombinovány se subjektivními úsudky. a
Fotografování fluorescenčním mikroskopem je velmi potřebné pro záznam fluorescenčních snímků. Protože fluorescence snadno slábne a slábne, je nutné zaznamenávat výsledky v reálném čase. Metoda je v podstatě stejná jako u běžné mikrofotografie. Stačí použít vysokorychlostní fotocitlivý film. Protože ultrafialové světlo má silný vliv na zhášení fluorescence, jako jsou markery FITC, jas fluorescence se při ozařování ultrafialovým světlem po dobu 30 sekund sníží o 50 procent. Pokud je tedy rychlost expozice příliš nízká, fluorescenční snímek nelze pořídit. Všeobecné výzkumné fluorescenční mikroskopy mají poloautomatická nebo plně automatická fotomikrografická systémová zařízení. a
a
4. Bezpečnostní opatření pro použití fluorescenční mikroskopie
A. Pracujte přísně v souladu s požadavky továrních pokynů fluorescenčního mikroskopu a neměňte program libovolně. a
b. Kontrola by měla být provedena v tmavé místnosti. Po vstupu do temné komory připojte zdroj napájení a zapalte ultra vysokotlakou rtuťovou výbojku po dobu 5-15 minut. Poté, co se silné světlo ze světelného zdroje ustálí, oči se zcela přizpůsobí temné komoře a poté začnou pozorovat preparát. a
C. Abyste zabránili poškození očí ultrafialovými paprsky, používejte při nastavování zdroje světla ochranné brýle. a
d. Doba kontroly je vždy nejlépe 1-2 hodin. Pokud překročí 90 minut, intenzita svítivosti ultravysokotlaké rtuťové výbojky se postupně sníží a fluorescence slábne; poté, co je vzorek ozařován ultrafialovým světlem po dobu 3-5 minut, fluorescence také výrazně zeslábne; proto by to nemělo přesáhnout maximálně 2-3 hodin. . a
E. Životnost zdroje světla fluorescenčního mikroskopu je omezená a vzorky by měly být kontrolovány centrálně, aby se ušetřil čas a ochránil zdroj světla. Když je horké počasí, měly by být přidány ventilátory, které odvádějí teplo, a nové žárovky by se měly zaznamenávat od začátku doby jejich používání. Chcete-li ji po zhasnutí lampy znovu použít, musíte před zapálením počkat, dokud žárovka dostatečně nevychladne. Vyhněte se osvětlení zdroje světla několikrát denně. a
F. Pozorujte vzorek ihned po obarvení, protože fluorescence bude časem postupně slábnout. Pokud je vzorek skladován v polyetylenovém plastovém sáčku při 4 stupních, doba zeslabení fluorescence může být zpožděna a montážní činidlo může být zabráněno odpařování. a
G. Posudkový standard jasu fluorescence: obecně se dělí do čtyř úrovní, to znamená, že „-“ znamená, že není vidět žádná nebo slabá fluorescence. "plus" znamená, že byla pozorována pouze jasně viditelná fluorescence. "plus plus" znamená, že je viditelná jasná fluorescence. "plus plus plus" znamená viditelnou jasnou fluorescenci.
