Úprava systému zobrazení optické dráhy světelného mikroskopu a obrys mikroskopického vyšetření
Úprava systému zobrazovací optické dráhy a obrysu mikroskopického vyšetření
Úprava zobrazovacího optického systému mikroskopu se provádí podle potřeb různých mikroskopických technik. Takzvaná mikroskopie je v kostce metoda osvětlení používaná při pozorování vzorku mikroskopem a technika a způsob získání lepšího kontrastu v obrazu tvořeném vzorkem. Následující text stručně popisuje, jak mikroskopie vyzrála v několika metodách a odpovídající metodě nastavení optického systému zobrazování mikroskopu.
1. Světlé pole přenosu:
Toto je nejtradičnější a nejběžnější způsob aplikace od vynálezu mikroskopu. Základní komponenty: a. Objektiv: pro pozorování v jasném poli lze použít jakoukoli objektivovou čočku; b. Pozorovací dalekohled: lze použít všechny druhy pozorovacích dalekohledů, nejlépe vybavené aperturní clonou. Metoda úpravy: Po nastavení osvětlovacího systému Kuhler výše uvedeného mikroskopu lze použít metodu světlého pole. Rozsah použití: všechny obarvené řezy tkání, krevní nátěry atd. Bezpečnostní opatření: a. Při použití metody pozorování ve světlém poli je nutné upravit osvětlovací systém Kuhler; b. Clona zorného pole by se neměla svévolně otevírat a přední čočka kondenzorového zrcadla by měla být umístěna fakticky ven a do optické dráhy při použití čoček objektivu 10×, méně než 10× a více než 10×. ×; C. Aperturní clona kondenzorového zrcadla by se neměla používat k nastavení jasu zorného pole a výška kondenzorového zrcadla by neměla být nastavována bez rozdílu, jinak se sníží rozlišení mikroskopu a rozlišení obarvené tkáně bude poškozen. rozlišení mikroskopu a poškození bylo přizpůsobeno osvětlovacímu systému Kuhler; d. u mikrosnímků musíte při každé změně použití zvětšení objektivu upravit aperturní clonu kondenzorové čočky tak, aby se její velikost přesně rovnala numerické apertuře použité v čočce objektivu 2/3.
2. Metoda fázového kontrastu procházejícího světla:
Jedná se o moderní mikroskopické vyšetření metodou zvýšení kontrastu. Základní komponenty: čočka objektivu s fázovým kontrastem, světlé zorné pole a víceúčelový dalekohled s fázovým kontrastem, zaostřovací dalekohled, zelené filtry.
Způsoby úpravy:
A. Na základě nastavení osvětlovacího systému Kuhler jasně zaostřete vzorek pomocí metody světlého pole
b. Otočte zaměřovací dalekohled na Ph1, abyste vyrovnali polohu stupnice, zvolte čočku objektivu s 10× fázovým kontrastem a vyměňte průhledný vzorek, který chcete pozorovat.
C. Odpojte jeden z okulárů, nahraďte jej centrovaným dalekohledem a zaostřete na dva kroužky fázového kontrastu v zorném poli (černý kroužek fázového kontrastu čočky objektivu a kroužek fázového kontrastu propustnosti světla na kondenzorové čočce).
d. Dva kroužky fázového kontrastu v zorném poli se nemusí nutně shodovat, seřiďte dvě nastavovací zařízení na pozorovacím dalekohledu (nastavení levé a pravé polohy páky nastavení kroužku fázového kontrastu a nastavení přední a zadní polohy třecího knoflíku) , takže kroužek pro přenos světla pro přední a zadní stranu vpravo a vlevo se shoduje s černým kroužkem
E. Po nastavení se vraťte zpět do okuláru k pozorování a zatlačte zelený filtr do optické dráhy, abyste mohli pozorovat fázově kontrastní obraz vzorku.
F. Pokud jsou pro pozorování k dispozici čočky objektivu 20× a 40×, měla by být čočka nastavena do polohy Ph2 a při použití čoček se 100 objektivy by měla být čočka nastavena do polohy Ph3.
Rozsah použití: Je vhodný pro pozorování průhledných, neobarvených nebo nebarvitelných vzorků, jako jsou všechny druhy buněk, živé tkáně, nebarvené nebo nebarvené řezy tkání, vodní organismy a tak dále.
3. Metoda fázového kontrastu diferenciální interference:
Aby bylo možné překonat metodu fázového kontrastu pozorování detailů vzorku kolem obrazu doprovázeného halo, bude maskovat detaily, které by měly být vidět, stejně jako vzorky nebo řezy tkání vyžadují poměrně tenkou tloušťku, v zásadě mohou být tlustší než 10?m a další omezení, použití principu dvoupaprskové interference pro návrh metody subdiferenciální interference fázového kontrastu.
Způsoby úpravy:
A. Metoda DIC musí být upravena na základě toho, že systém Kulemin byl již seřízen
b. Pomocí čočky objektivu 10× určete polohu zaostření čočky objektivu, která dokáže jasně vidět vzorek s jasným zorným polem.
C. Umístěte polarizátor do osvětlovací dráhy s tím, že by měl být orientován ve směru východ-západ.
d. Otočte kolečko kondenzoru do polohy odpovídající použití 10 × objektivu, tj. DIC 0.3-0.4.
E. Vložte jezdec DIC pro čočku objektivu 10× na zadní stranu čočky objektivu nebo na konvertor objektivu.
F. Vložte analyzátor do zobrazovací optické dráhy a všimněte si, že jeho orientace by měla být jih-sever.
G. Vyměňte průhledný vzorek, který chcete pozorovat, zapněte zdroj světla, aby se vzorek jasně zaostřil.
h. Upravte vložku DIC tak, aby obraz diferenciálního interferenčního kontrastu dosáhl nejlepšího efektu, tedy nejzřetelnějšího reliéfního efektu.
i. Zároveň nastavte aperturní clonu kondenzorového zrcátka tak, aby byl také optimální efekt kontrastu.
j. Poté dolaďte detaily vzorku, abyste viděli strukturu vzorku na různých úrovních.
k. Pokud je vložena doplňková barva (červená retardační destička prvního řádu) a současně je upravena vložka DIC, lze v zorném poli vidět neustále se měnící zářivé barvy, přičemž červená, oranžová, žlutá, zelená, modrá, fialová, růžová, růžovofialová a zlatožlutá. Oblast použití: průhledné nebo nebarvitelné tkáňové řezy, tloušťka do cca 100?m, živá tkáň a živé buňky v kultuře, malé živé organismy a tak dále.
