Princip činnosti laserového konfokálního mikroskopu
Laserová konfokální mikroskopie je založena na zobrazování fluorescenčním mikroskopem s přidáním laserového skenovacího zařízení, použití počítačového zpracování obrazu, rozlišení optického zobrazení zvýšené o 30 % - 40 %, použití buzení fluorescenčního ultrafialového nebo viditelného světla sondy, aby se získal fluorescenční obraz vnitřní mikrostruktury buněk nebo tkání, na subcelulární úrovni k pozorování fyziologických signálů a změn buněčné morfologie, jako je Ca2+, PH, membránový potenciál atd. nová generace výkonných výzkumných nástrojů v morfologii, molekulární biologii, neurovědě, farmakologii, genetice a dalších oborech. Laserový konfokální zobrazovací systém je výkonná nová generace výzkumných nástrojů v oblasti morfologie, molekulární biologie, neurovědy, farmakologie, genetiky a tak dále. Laserový konfokální zobrazovací systém lze použít k pozorování různých obarvených, nebarvených a fluorescenčně značených tkání a buněk atd., k pozorování a studiu růstu a vývoje tkáňových řezů a buněk in vivo a ke studiu a měření intracelulárních transport látek a přeměna energie. Je schopen provádět studium změn iontů a PH v živých buňkách (RATIO), výzkum neurotransmiterů, diferenciální interferenční a fluorescenční tomografii, vícenásobnou fluorescenční tomografii a přesah, fluorescenční spektroskopickou analýzu fluorescenčních indikátorů kvantitativní analýzy fluorescenčních vzorků časo- zpožděné skenování a dynamické složky trojrozměrné dynamické struktury tkání a buněk, analýza přenosu fluorescenční rezonanční energie, výzkum fluorescenční in-situ hybridizace (FISH), výzkum cytoskeletu (FISH) a studium cytoskeletu. FISH), výzkum cytoskeletu, výzkum genové lokalizace, in situ analýza produktu PCR v reálném čase, výzkum obnovy fluorescenčního bělení (FRAP), výzkum mezibuněčné komunikace, výzkum interproteinů, výzkum membránového potenciálu a membránové fluidity atd. analýza analýzy obrazu a trojrozměrné rekonstrukce a další analýzy.
Oblasti použití systému laserového konfokálního mikroskopu:
Zahrnuje medicínu, vědecký výzkum zvířat a rostlin, biochemii, **ologii, buněčnou biologii, tkáňové embryo, potravinářství, genetiku, farmakologii, fyziologii, optiku, patologii, botaniku, neurovědu, mořskou biologii, nauku o materiálech, elektronickou vědu, mechaniku, ropu geologie, mineralogie.
Základní principy
Tradiční optický mikroskop využívá polní světelný zdroj, obraz každého bodu na preparátu bude rušen difrakcí nebo rozptylem světla od sousedních bodů; laserový konfokální mikroskop používá laserový paprsek skrz osvětlovací dírku k vytvoření bodového zdroje světla pro skenování každého bodu v ohniskové rovině vzorku, ozářený bod na vzorku bude zobrazen v detekčním otvoru a poté bude přijat detekční dírky za bodovou násobící trubicí (PMT) nebo studeným elektrovazbovým zařízením (cCCD), bod po bodu nebo řádek po řádku, a poté se rychle zobrazí na monitoru počítače. Přijímaný bod po bodu nebo řádek po řádku pomocí PMT nebo cCCD za dírkou sondy, fluorescenční obraz se rychle vytvoří na obrazovce monitoru počítače. Osvětlovací dírka a detekční dírka jsou sdružené s ohledem na ohniskovou rovinu čočky objektivu, body na ohniskové rovině jsou zaostřeny na osvětlovací dírku a emisní dírku současně a body mimo ohniskovou rovinu nebudou být zobrazen v detekčním otvoru, takže získaný konfokální obraz je optickým řezem preparátem, který překonává nevýhodu rozostření obrazu běžného mikroskopu.
