Co je mikroskopie v temném poli? Jak malá je buňka vidět?
Mikroskop v tmavém poli je typ optického mikroskopu, nazývaný také ultramikroskop. Ve středu kondenzoru mikroskopu s tmavým polem je světelný štít, takže osvětlovací světlo neproniká přímo do lidské čočky. Do čočky objektivu může vstupovat pouze světlo odražené a ohýbané vzorkem. Proto je pozadí zorného pole černé a okraje objektů světlé. z. Tento druh mikroskopu může vidět částice o velikosti 4 ~ 200 nm a rozlišení může být 50krát vyšší než u běžných mikroskopů.
zásada
Mikroskop v tmavém poli je modifikován na základě struktury běžného optického mikroskopu s využitím principu Tyndallova optického efektu. Kondenzátory Darkfield umožňují blokování centrálního paprsku světelného zdroje. Do čočky objektivu není možné vstupovat přes preparát zdola nahoru. V důsledku toho světlo mění svou dráhu a ozařuje na pozorovaný preparát šikmo. Při setkání se světlem se vzorek odráží nebo rozptyluje. Rozptýlené světlo je vrženo do čočky objektivu, takže celé zorné pole je tmavé.
Základním principem mikroskopie v tmavém poli je Tyndallův jev. Když paprsek světla prochází tmavou místností, lze ve vzduchu pozorovat jasnou prachovou "cestu" ze směru kolmého na dopadající světlo. Tímto jevem je Tyndallův efekt. Po výměně mikroskopu v tmavém poli za kondenzor v tmavém poli na běžném optickém mikroskopu nemůže v důsledku okluze vnitřní parabolické struktury kondenzoru světlo ozařující povrch kontrolovaného předmětu přímo vstupovat do objektivu čočkou a okulárem a skrz může procházet pouze rozptýlené světlo, čímž se zmenší zorné pole. je tmavý. Vzhledem k tomu, že mikroskop v tmavém poli nevyzařuje průhledné světlo do systému přímého pozorování, když tam není žádný objekt, zorné pole je tmavé a není možné pozorovat žádný objekt; když je tam nějaký předmět, světlo odražené zpět objektem a rozptýlené světlo jsou jasně viditelné na tmavém pozadí. . Při pozorování předmětu v tmavém poli se většina osvětlovacího světla láme. Vzhledem k umístění, struktuře a tloušťce předmětu (vzorku) se rozptyl a lom světla velmi liší.
Struktura a modifikace
Základní strukturou mikroskopu s tmavým polem je běžná optická sada mikroskopu plus světelná závora. Obyčejný mikroskop lze přeměnit na mikroskop v tmavém poli, pokud je kondenzor vyjímatelný a průměr držáku je vhodný pro instalaci kondenzoru v tmavém poli. Pokud není k dispozici kondenzor tmavého pole, můžete použít silný černý papír k vytvoření centrálního světelného štítu a umístit jej na rám filtru pod kondenzor běžného mikroskopu, abyste získali efekt tmavého pole. Světelný štít slouží k blokování světla uprostřed světelného zdroje tak, aby světlo mohlo do preparátu vstupovat pouze z okolí. Velikost je přibližně stejná jako velikost clony. Různá zvětšení používají různé clony, takže je třeba vytvořit různé světelné bloky.
Praktická aplikace
Mikroskopie v temném poli se často používá k pozorování nezabarvených průhledných vzorků. Protože tyto vzorky mají index lomu podobný indexu lomu okolního prostředí, je obtížné je jasně vidět za běžných podmínek jasného pole. Ke zlepšení kontrastu mezi samotným vzorkem a pozadím se proto používají podmínky tmavého pole. Tento druh mikroskopu může vidět částice o velikosti 4 ~ 200 nm. Může pouze vidět existenci, pohyb a povrchové charakteristiky předmětu, ale nedokáže rozlišit jemnou strukturu předmětu. Klinicky se k vyšetření bledých spirochet běžně používá mikroskopie v temném poli. Jedná se o test na patogeny, který má velký význam pro diagnostiku časné syfilis.
