Jaké metody osvětlení jsou k dispozici pro mikroskopy?
1. Prosvětlení
Biologické mikroskopy se většinou používají k pozorování průhledných preparátů a je potřeba je osvětlit procházejícím světlem. Existují dva způsoby osvětlení
(1) Poté, co zdroj kritického osvětlení projde kondenzorem, zobrazí se na rovině objektu, jak je znázorněno na obrázku 5. Pokud se ignoruje ztráta světelné energie, jas obrazu zdroje světla je stejný jako jas světla. zdroj samotného, takže tato metoda je ekvivalentní umístění zdroje světla na rovinu objektu. Je zřejmé, že při kritickém osvětlení, pokud jas povrchu světelného zdroje není rovnoměrný nebo zjevně vykazuje malé struktury, jako jsou vlákna atd., bude pozorovací účinek mikroskopu vážně ovlivněn, což je nevýhoda kritické osvětlení. Nápravou je umístit před světelný zdroj mléčně bílé a teplo pohlcující barevné filtry, aby bylo osvětlení rovnoměrnější a zabránilo se poškození kontrolovaného objektu dlouhodobým ozařováním světelného zdroje. Při osvětlení procházejícím světlem je aperturní úhel zobrazovacího paprsku čočky objektivu určen aperturním úhlem čtvercového paprsku kondenzorového zrcadla. Aby bylo možné plně využít numerickou aperturu čočky objektivu, měla by mít kondenzorová čočka stejnou nebo o něco větší numerickou aperturu jako čočka objektivu.
(2) Kola osvětlení Nevýhodu nerovnoměrného osvětlení povrchu objektu v kritickém osvětlení lze eliminovat u Kola osvětlení. Mezi světelný zdroj 1 a kondenzorovou čočku 5 je přidána pomocná kondenzátorová čočka 2, jak je znázorněno na Obr. 6. Je vidět, že zorné pole (vzorek) čočky objektivu je rovnoměrně osvětleno, protože světelný zdroj není přímo osvětlen, ale pomocný kondenzor 2 (také nazývaný Kolarovo zrcadlo) rovnoměrně osvětlený světelným zdrojem je zobrazen na vzorek 6.
2. epiiluminace
Při pozorování neprůhledných předmětů, jako je pozorování kovových brusných kotoučů metalografickým mikroskopem, je často osvětlen ze strany nebo shora. V tomto okamžiku není na povrchu pozorovaného předmětu žádné krycí sklo a obraz preparátu je generován odraženým nebo rozptýleným světlem vstupujícím do čočky objektivu. Jak je znázorněno na obrázku 7.
3. Iluminační metoda pro pozorování částic pomocí tmavého pole
Ultramikroskopické částice lze pozorovat metodou tmavého pole. Takzvané ultramikroskopické částice označují ty drobné částice, které jsou menší než mez rozlišení mikroskopu. Princip osvětlení tmavým polem je: nenechat světlo hlavního osvětlení proniknout do čočky objektivu a pouze světlo rozptýlené částicemi může vstoupit do čočky objektivu pro zobrazení.
Proto je obraz jasných částic uveden na tmavém pozadí. Přestože je pozadí zorného pole tmavé, kontrast (kontrast) je velmi dobrý, což může zlepšit rozlišení.
Osvětlení tmavého pole lze rozdělit na jednosměrné a obousměrné
(1) Jednosměrné osvětlení tmavého pole Obrázek 8 je schematický diagram jednosměrného osvětlení tmavého pole. Z obrázku je vidět, že poté, co je světlo emitované iluminátorem 2 odraženo neprůhledným vzorkem 1, hlavní světlo nevstupuje do čočky objektivu 3 a světlo vstupující do čočky objektivu je převážně rozptýleno částicemi nebo nerovnoměrným podrobnosti. Je zřejmé, že toto jednosměrné osvětlení tmavým polem je účinné pro pozorování existence a pohybu částic, ale není účinné pro reprodukci detailů objektů, to znamená, že dochází k jevu „zkreslení“.
(2) Obousměrné osvětlení tmavého pole Obousměrné osvětlení tmavého pole může eliminovat vadu zkreslení způsobenou jednosměrným osvětlením. Před společný tříčočkový kondenzor umístěte prstencovou clonu, jak je znázorněno na obrázku 9, abyste realizovali obousměrné osvětlení tmavého pole. Kapalina je ponořena mezi poslední kus kondenzoru a sklo objektivu, přičemž prostor mezi krycím sklem a čočkou objektivu je suchý. Proto se prstencový paprsek procházející kondenzorem zcela odráží v krycím sklíčku a nemůže vstoupit do čočky objektivu a vytvořit smyčku, jak je znázorněno na obrázku. Pouze světlo rozptýlené částicemi na preparátu vstupuje do čočky objektivu a vytváří obousměrné osvětlení tmavého pole.
