Tři typy mikroskopického pozorování
I. Světlé pole BF (Světlé pole BF)
Bright field BF je známý způsob mikroskopie, který je široce používán v patologii a testování pro pozorování obarvených řezů a všechny mikroskopy jsou schopny vykonávat tuto funkci.
Světlé pole
II. Tmavé pole DF (Dark field DF)
Dark field DF je ve skutečnosti osvětlení tmavého pole. Od světlého pole se liší tím, že nepozoruje přímo osvětlené světlo, ale světlo odražené nebo odražené od zkoumaného předmětu. V důsledku toho se zorné pole stává tmavým pozadím, zatímco zkoumaný objekt se jeví jako světlý obraz.
Princip tmavého zorného pole je založen na Tyndallově jevu v optice, prach v případě silného světla přes přímé světlo nelze pozorovat lidským okem, je to kvůli silnému světlu kolem příčiny. Je-li na ni světlo nasměrováno šikmo, částice se zdánlivě zvětšují v důsledku odrazu světla a stávají se viditelnými pro lidské oko.
Speciálním příslušenstvím potřebným pro pozorování v temném poli je pozorovací dalekohled v temném poli. Vyznačuje se tím, že světelný paprsek neprochází zkoumaným objektem zdola nahoru, ale mění dráhu světla tak, aby směřovala šikmo k zkoumanému objektu, takže osvětlující světlo nevstupuje přímo do objektu. čočkou objektivu a pomocí odraženého nebo odraženého světla od povrchu zkoumaného předmětu se vytvoří jasný obraz. Rozlišení pozorování v tmavém poli je mnohem vyšší než u pozorování ve světlém poli, * až 0.02-0.004
Darkfield
III. Fázový kontrast PH
Ve vývoji optické mikroskopie je úspěšný vynález fázového kontrastu PH důležitým úspěchem v moderní mikroskopické technologii. Jak víme, lidské oko dokáže rozlišit pouze vlnovou délku (barvu) a amplitudu (jas) světelných vln, u bezbarvých a jasných biologických vzorků se při průchodu světla vlnová délka a amplituda příliš nemění a je obtížné pozorovat preparát v pozorování ve světlém poli.
Mikroskop s fázovým kontrastem využívá k mikroskopickému zkoumání rozdílu světelného rozsahu zkoumaného objektu, to znamená, že efektivně využívá interferenční jev světla ke změně nerozlišitelného fázového rozdílu lidského oka na rozlišitelný rozdíl amplitud, a to i bezbarvý a průhledný. látky mohou být jasně viditelné. To značně usnadňuje pozorování živých buněk, proto je mikroskopie s fázovým kontrastem široce používána v inverzních mikroskopech.
Základní princip mikroskopie s fázovým kontrastem spočívá v tom, že rozdíl v optickém rozsahu viditelného světla procházejícího vzorkem se mění na rozdíl v amplitudě, čímž se zvyšuje kontrast mezi různými strukturami a jsou viditelné. Světlo se láme přes vzorek a odchyluje se od původní dráhy světla, přičemž je zpožděno o 1/4λ (vlnová délka). Pokud se 1/4λ opět zvýší nebo sníží, rozdíl optického rozsahu se stane 1/2λ a interference mezi dvěma paprsky fotosyntézy se zesílí poté, co dojde k interferenci s osami dvou paprsků, a amplituda se zvýší nebo sníží, takže zlepšení kontrastu. Ve struktuře má mikroskop s fázovým kontrastem dvě speciální vlastnosti, které se liší od běžného optického mikroskopu:
1. prstencová clona (anulardiaphragm) je umístěna mezi zdrojem světla a kondenzorem, úlohou je přimět světlo skrz kondenzor tak, aby vytvořilo dutý kužel světla se zaměřením na preparát.
2. fázová destička (prstencová fázová destička) v čočce objektivu potažená fázovou destičkou fluoridu hořečnatého, přímé nebo ohybové světlo může být zpožděno o fázi 1/4λ. Existují dva druhy:
1. Fázová deska: přímé světlo zpožděné o 1/4 λ, dvě skupiny světelných vln koaxiální sčítání světelných vln, zvýšení amplitudy, struktura vzorku než okolní prostředí je jasnější, vytvoření jasného kontrastu (nebo negativního kontrastu) .
2.B fázová deska: difraktované světlo je zpožděno o 1/4 λ, dvě skupiny světelných vln po splynutí osy světelné vlny se zmenšují, amplituda se zmenšuje, vzniká tmavý kontrast (nebo pozitivní kontrast ), struktura je tmavší než okolní médium.
