Struktura a hlavní součásti fluorescenčního mikroskopu
(1) Světelný zdroj
V dnešní době se jako zdroj světla běžně používá 200W ultra vysokotlaká rtuťová výbojka. Je vyroben z křemenného skla, uprostřed má kulovitý tvar a uvnitř je naplněno určité množství rtuti. Během provozu způsobí výboj mezi dvěma elektrodami odpařování rtuti a tlak uvnitř koule se rychle zvýší. Když se rtuť úplně odpaří, může dosáhnout 50-70 standardního atmosférického tlaku, což obecně trvá asi 5-15 minut. Luminiscence ultravysokotlakých rtuťových výbojek je výsledkem výboje mezi elektrodami, který nepřetržitě disociuje a redukuje molekuly rtuti a emituje fotony. Vyzařuje silné ultrafialové a modrofialové světlo, které stačí k excitaci různých fluorescenčních látek, proto je široce používán ve fluorescenčních mikroskopech.
Ultra vysokotlaké rtuťové výbojky také vydávají velké množství tepelné energie. Proto musí mít místnost s lampami dobré podmínky pro odvod tepla a teplota pracovního prostředí by neměla být příliš vysoká.
Nová ultra vysokotlaká rtuťová výbojka nevyžaduje k zapálení v rané fázi použití vysoké napětí. Po nějaké době používání je potřeba jej nastartovat vysokým napětím (cca 15000V). Po spuštění se pracovní napětí obecně udržuje na 50-60V a pracovní proud je asi 4A. Průměrná životnost 200W ultra vysokotlaké rtuťové výbojky je asi 200 hodin při každém použití po dobu 2 hodin. Čím kratší je doba provozu, tím kratší je životnost. Pokud je provozován pouze 20 minut jednou, životnost se sníží o 50 %. Snažte se proto při používání minimalizovat počet startů. Světelná účinnost žárovky se během používání postupně snižuje. Poté, co kontrolka zhasne, musí před restartem počkat na ochlazení. Po rozsvícení žárovky by se neměla okamžitě zhasínat, aby nedošlo k neúplnému odpaření rtuti a poškození elektrody. Obecně je třeba počkat 15 minut. Kvůli vysokému tlaku a silnému ultrafialovému záření ultravysokotlaké rtuťové výbojky musí být žárovka před zapálením umístěna do komory lampy, aby se zabránilo poranění očí a výbuchu během provozu.
Obvod ultravysokotlaké rtuťové výbojky (100W nebo 200W) světelného zdroje a jeho součástí včetně transformace napětí, potlačení proudu a spouštění. V místnosti s lampami je systém pro nastavování středu světla žárovky s hliníkovým konkávním reflektorem nainstalovaným za žárovkou a čočkou pro sběr světla nainstalovanou v přední části.
V tuzemsku vyráběná ultravysokotlaká rtuťová výbojka GCQ-200 má dobrý výkon a může nahradit dovážené žárovky, jako je HBO-200, s průměrnou životností přes 200 hodin a relativně nízkou cenou.
Jednoduché a přenosné zařízení s bromwolframovým fluorescenčním zdrojem světla s vysokou barevnou teplotou vyvinuté v Číně, s malým objemem, nízkou hmotností, nízkou spotřebou, dvojím použitím AC a DC (s vestavěným DC napájením), snadné přenášení, pohodlné použití , byl povýšen a aplikován.
(2) Systém barevného filtrování
Systém barevných filtrů je důležitou součástí fluorescenčního mikroskopu, který se skládá z excitační filtrační desky a kompresní filtrační desky. Model filtrační desky je mezi výrobci často nekonzistentní. Filtrační desky jsou obecně pojmenovány podle základního barevného tónu, přičemž první písmeno představuje barevný tón, druhé písmeno představuje sklo a číslo představuje charakteristiku modelu. mikroskop Olympus
(3) Objektiv
Lze použít různé objektivy, ale použití achromatických objektivů je vhodné pro fluorescenci kvůli jejich extrémně nízké vlastní fluorescenci a propustnosti (rozsah vlnových délek). Vzhledem k tomu, že fluorescenční jas obrazu v zorném poli mikroskopu je přímo úměrný druhé mocnině poměru apertury čočky objektivu a nepřímo úměrný jejímu zvětšení, za účelem zlepšení jasu fluorescenčního obrazu je čočka objektivu měl by být použit větší poměr clony. Zejména při velkém zvětšení je jeho dopad velmi výrazný. Proto by se u preparátů s nedostatečnou fluorescencí měla používat čočka objektivu s vysokou světelností v kombinaci s co nejnižším okulárem (4 x, 5 x, 6,3 x atd.).
(4) Reflexní zrcátko
Reflexní vrstva reflektoru je obecně pokovená hliníkem, protože hliník absorbuje méně ultrafialového a viditelného světla v modrofialové oblasti s odrazem přes 90 %, zatímco stříbro odráží pouze 70 %; Obecně se používají ploché reflektory.
(5) Zrcátko bodového světla
Koncentrátor navržený a vyrobený speciálně pro fluorescenční mikroskopii je vyroben z křemenného skla nebo jiného skla, které propouští ultrafialové světlo. Existují dva typy spotterů tmavého pole s odlišným zorným polem. K dispozici je také diferenciální fluorescenční koncentrátor.
(6) Zařízení pro padající světlo
Nový typ zařízení pro dopadající světlo odráží části s kratší vlnovou délkou (ultrafialové a fialově modré) ze zdroje světla do filtru interferenčního spektrofotometru díky vlastnostem povlaku na filtru. Když je filtr otočen ke zdroji světla pod úhlem 45 stupňů. Při naklonění směřuje vertikálně k čočce objektivu a přes čočku objektivu směřuje ke vzorku, což způsobuje excitaci vzorku. V tomto okamžiku čočka objektivu přímo funguje jako kondenzor. Zároveň jsou dlouhé části filtru (zelená, žlutá, červená atd.) pro filtr průhledné, takže se neodrážejí ve směru objektivu. Filtr funguje jako excitační filtrační deska, a protože fluorescence vzorku je v oblasti dlouhé vlnové délky viditelného světla, lze jej pozorovat přes filtr a dosáhnout objektivu. Jas fluorescenčního obrazu se zvyšuje se zvětšením a je silnější než procházející světelný zdroj při velkém zvětšení. Kromě své funkce transmisivního zdroje světla je vhodnější pro přímé pozorování neprůhledných a poloprůhledných preparátů, jako jsou tlusté destičky, filtrační membrány, kolonie, preparáty tkáňových kultur apod. V posledních letech se nově vyvíjené fluorescenční mikroskopy často používat zařízení s padajícím světlem, známá jako fluorescenční mikroskopy s padajícím světlem.
