Rozlišovací schopnost mikroskopu je dána různými podmínkami optického systému
1, numerická apertura, také známá jako zrcadlová ústní rychlost (nebo rychlost otevření), zkráceně NA, v čočce objektivu a koncentrátoru je označena svou numerickou aperturou, numerická apertura je hlavním parametrem čočky objektivu a koncentrátoru, ale také důležitým ukazatelem pro určení jejich výkonnosti. Číselná clona a výkon mikroskopu má úzký vztah s rozlišovací schopností mikroskopu je přímo úměrná hloubce ostrosti je nepřímo úměrná druhé odmocnině jasu zrcadla je přímo úměrná. Číselnou aperturu lze vyjádřit následujícím vzorcem: NA=n.sin 2 kde: n - čočka objektivu a preparát mezi rychlostí srážení média - čočka objektivu úhel ústí zrcadla Tzv. úhel ústí je optická osa od čočky objektivu bodu předmětu světla vyzařovaného čočkou objektivu a čočky objektivu před čočkou efektivního průměru okraje úhlu listu, viz obrázek {{6 }}. Úhel ústí zrcadla je vždy menší než 18{{10}} stupňů. Protože index lomu vzduchu je 1, je numerická apertura suché čočky objektivu vždy menší než 1, obecně 0.05-0.95; čočka objektivu ponořená do oleje, např. ponořená z cedrového oleje (index lomu 1,515), numerická apertura se může blížit hodnotě 1,5 Teoretická mez numerické apertury se sice rovná indexu lomu použitého ponořeného média, ale v praxi od z hlediska technologie výroby čočky není možné tuto hranici dosáhnout. V praxi není možné s technologií výroby čoček dosáhnout této hranice. Obecně platí, že velká numerická apertura olejové imerzní čočky je 1,4 v praktických mezích. Indexy lomu různých médií jsou následující: 1,0 pro vzduch, 1,33 pro vodu, 1,5 pro sklo, 1,47 pro glycerin a 1,52 pro cedrový olej.
2 lze rozlišovací schopnost D vyjádřit následujícím vzorcem: D=λ/2N.A. Vlnová délka viditelného světla je 0.4-0,7 mikronů, průměrná vlnová délka je 0,55 mikronů. Pokud je numerická apertura objektivu 0,65, D {{10}},55 mikronů / 2 × 0.65=0,42 mikronů. To znamená, že vzorek lze pozorovat, pokud je větší než 0,42 mikronu, ale nelze jej vidět, pokud je menší než 0,42 mikronu. Pokud je použita čočka objektivu s numerickou aperturou 1,25, D=2,20 mikronů. Pokud je délka pozorovaného objektu větší než tato hodnota, je vidět. Je vidět, že čím menší hodnota D, tím vyšší rozlišení a čistší objekt. Podle výše uvedeného vzorce můžete: (1) snížit vlnovou délku; (2) zvýšení indexu lomu; (3) zvětšete úhel zrcadla pro zlepšení rozlišení. Ultrafialové světlo jako zdroj světla pro mikroskopy a elektronové mikroskopy je použití krátkých světelných vln ke zlepšení rozlišení pro vidění menších objektů. Rozlišovací schopnost čočky objektivu úzce souvisí s tím, zda je obraz čistý. Okuláry tuto sílu nemají. Okulár pouze zvětšuje obraz vytvářený objektivem.
3, zvětšení: mikroskop zvětšuje objekt, nejprve přes čočku objektivu * druhé zvětšení obrazu, okulár v jasné vzdálenosti způsobené druhým zvětšením obrazu. Zvětšení je poměr velikosti obrázku k velikosti původního objektu. Zvětšení mikroskopu (V) se tedy rovná zvětšení objektivu (V1) a zvětšení okuláru (V2) produktu, tedy: V=V1 × V2 Porovnání metody výpočtu, lze získat z následujícího vzorce M=△ × D F1 F2 F1=Ohnisková vzdálenost objektivu, F2=Ohnisková vzdálenost okuláru △=Délka optického tubusu , D=vizuální vzdálenost (= 250 mm) △=zvětšení objektivu, D=zvětšení okuláru M=zvětšení mikroskopu F1 F2 Nastavte △=160 mm F1=4 mm D=250 mm F2=150 mm, poté M=△ × D=160 × {{25} } × 16. 7=668 krát F1 F2 4 15
4, Hloubka ostrosti: Při pozorování preparátu pod mikroskopem je objekt jasný, když je zaostřeno na určitou obrazovou rovinu, která je cílovou rovinou. V zorném poli kromě cílové roviny vidíte také rozmazané objekty nad a pod cílovou rovinou a vzdálenost mezi těmito dvěma plochami se nazývá hloubka ostrosti. Hloubka ostrosti čočky objektivu a numerická apertura a zvětšení jsou nepřímo úměrné, to znamená, že čím větší je numerická apertura a zvětšení, tím menší je hloubka ostrosti. Proto je třeba na úpravu olejového zrcátka než na úpravu zrcátka s nízkým zvětšením dávat větší pozor, jinak se snadno stane, že objekt proklouzne a nelze jej najít.
