Rozdíl mezi běžnou optickou mikroskopií a fluorescenční mikroskopií
Optický mikroskop: Jedná se o optický přístroj, který využívá optické principy ke zvětšení a zobrazení malých objektů, které lidské oko nerozezná, za účelem získání mikrostrukturálních informací pro lidi.
Fluorescenční mikroskop: Fluorescenční mikroskop používá ultrafialové světlo jako zdroj světla k osvětlení testovaného objektu, což způsobí, že emituje fluorescenci, a pak pozoruje tvar a polohu objektu pod mikroskopem. Fluorescenční mikroskopie se používá ke studiu absorpce, transportu, distribuce a lokalizace intracelulárních látek. Některé látky v buňkách, jako je chlorofyl, mohou po vystavení ultrafialovému záření emitovat fluorescenci; I když některé látky samy o sobě fluorescenci emitovat nemohou, mohou emitovat fluorescenci i po obarvení fluorescenčními barvivy nebo fluorescenčními protilátkami a ozáření ultrafialovým světlem. Fluorescenční mikroskopie je jedním z nástrojů kvalitativního a kvantitativního výzkumu těchto látek.
Optický mikroskop se obecně skládá ze stolku, osvětlovacího systému bodového světla, objektivu, okuláru a zaostřovacího mechanismu. Systém bodového osvětlení může získat různé metody pozorování, jako jsou tmavé body na světlém pozadí (známé jako osvětlení světlého pole) nebo jasné body na tmavém pozadí (známé jako osvětlení tmavého pole) změnou metody osvětlení, aby bylo možné lépe objevovat a pozorovat jemné struktury v různých situacích.
Fluorescenční mikroskopie a běžná mikroskopie mají následující rozdíly:
1. Metoda osvětlení je obvykle kapkového typu, kdy je zdroj světla promítán na vzorek přes čočku objektivu;
2. Zdrojem světla je ultrafialové světlo, s kratší vlnovou délkou a vyšším rozlišením než běžné mikroskopy;
3. Existují dva speciální filtry, jeden před světelným zdrojem se používá k odfiltrování viditelného světla a jeden mezi okulárem a čočkou objektivu se používá k odfiltrování ultrafialového světla k ochraně lidského oka.
Fluorescenční mikroskopie je také typem optického mikroskopu, přičemž hlavním rozdílem jsou různé excitační vlnové délky mezi těmito dvěma. To určuje rozdíly ve struktuře a použití mezi fluorescenčními mikroskopy a běžnými optickými mikroskopy.
Fluorescenční mikroskopie je základním nástrojem imunofluorescenční cytochemie. Skládá se z hlavních komponent, jako je světelný zdroj, systém filtračních desek a optický systém. Jedná se o použití určité vlnové délky světla k excitaci vzorku a emitování fluorescence, která je zvětšena přes systém objektivu a okuláru, aby se mohl pozorovat fluorescenční obraz vzorku.
