Několik problémů při použití mikroskopie s fázovým kontrastem:
(1) Reverzace fáze, když n '
(2) Efekt halo a postupného stmívání v zobrazovacím procesu mikroskopie s fázovým kontrastem, kdy struktura ztmavne v důsledku fázového zpoždění, není ztrátou světla, ale výsledkem redistribuce světla v rovině obrazu. Světlo, které jasně mizí v tmavých oblastech, se proto bude jevit jako jasné halo kolem tmavších objektů. To je nevýhoda mikroskopie s fázovým kontrastem, která brání pozorování jemných struktur. Když je prstencový otvor velmi úzký, je halo jev závažnější. Dalším jevem mikroskopie s fázovým kontrastem je efekt stmívání, který se týká snížení kontrastu na okrajích větší oblasti se stejným fázovým zpožděním pozorovaným při pozorování fázového kontrastu.
(3) Vliv tloušťky vzorku Při pozorování rozdílu by tloušťka vzorku měla být 5 μm nebo tenčí. Při použití silnějších vzorků je horní vrstva vzorku čistá, zatímco hlubší vrstva bude rozmazaná a způsobí interferenci fázového posunu a interferenci rozptylu světla.
(4) Vliv krycího skla a podložního sklíčka na vzorek musí být zakryt krycím sklem, jinak se světlý prstenec prstencového otvoru a tmavý prstenec fázové destičky obtížně překrývají. Diferenciální pozorování má také vysoké požadavky na kvalitu skla podložního a krycího skla. Pokud jsou škrábance, nerovnoměrná tloušťka nebo nerovnoměrné nerovnosti, může to způsobit zkreslení jasného prstence a fázové interference. Kromě toho, pokud je podložní sklíčko příliš silné nebo příliš tenké, způsobí to zvětšení nebo zmenšení prstencového otvoru.
V současné době se optické mikroskopy vyvinuly z tradičních biologických mikroskopů na různé typy specializovaných mikroskopů. Podle principu zobrazování je lze rozdělit na:
① Geometrický optický mikroskop: včetně biologického mikroskopu, mikroskopu s padajícím světlem, inverzního mikroskopu, metalografického mikroskopu, mikroskopu v tmavém poli atd.
② Fyzický optický mikroskop: včetně mikroskopu s fázovým kontrastem, polarizačního mikroskopu, interferenčního mikroskopu, polarizačního mikroskopu s fázovým kontrastem, interferenčního mikroskopu s fázovým kontrastem, fluorescenčního mikroskopu s fázovým kontrastem atd.
③ Mikroskopy pro konverzi informací: včetně fluorescenčních mikroskopů, mikrospektrometrů, mikroskopů pro analýzu obrazu, akustických mikroskopů, fotografických mikroskopů, televizních mikroskopů atd.
Uveďte několik použití mikroskopů: a Biologický mikroskop: Obecně lze mikroskopy rozdělit na stereomikroskopy a biologické mikroskopy. Kvůli různým účelům a požadavkům vzniklo mnoho odvětví, ale základní principy zůstávají stejné. Polarizace, fázový kontrast, transmise a dopadající světlo jsou stále klasifikovány jako biologické mikroskopy. Stereoskopický mikroskop, také známý jako anatomický mikroskop, pevný mikroskop a stereomikroskop, je všestranný mikroskop. Snadno se ovládá, má nízké požadavky na vzorky, má velkou pracovní vzdálenost a při pozorování má silný smysl pro trojrozměrnost. Může být použit k pozorování fyzických objektů nebo k provádění některých operací na vzorcích při pozorování. Místo krájení vzorku jako biologický mikroskop vyžaduje krájení odpovídající technologii a vybavení. Proto mají stereomikroskopy širokou škálu aplikací v oblastech, jako je mikroelektronika, přesná montáž a údržba nástrojů a mikrogravírování. Široce používaný v anatomii a mikrochirurgii v oblasti biologie a medicíny (v současnosti klasifikován jako chirurgické mikroskopy), světelným zdrojem používaným v biologii a medicíně může být pouze studený zdroj světla (vláknová optika); Používá se v průmyslu pro pozorování, montáž, kontrolu a další práce na malých součástkách a integrovaných obvodech. Metalografický mikroskop: Mnoho lidí to rádo píše jako "metalografický mikroskop". Metalografický mikroskop je mikroskop speciálně používaný k pozorování metalografické struktury neprůhledných předmětů, jako jsou kovy a minerály. Tyto neprůhledné objekty nelze pozorovat v běžném transmisním mikroskopu, takže hlavní rozdíl mezi nimi a běžným mikroskopem je v tom, že první používá odražené světlo, zatímco druhý používá k osvětlení procházející světlo. V metalografickém mikroskopu je osvětlovací paprsek směrován z čočky objektivu na povrch pozorovaného předmětu, od povrchu se odráží a poté se vrací do čočky objektivu pro zobrazení. Tato metoda reflexního osvětlení je také široce používána při detekci křemíkových plátků integrovaného obvodu.
