Proces výroby parafínových řezů pro světelnou mikroskopii
Aby bylo dosaženo lepšího kontrastu zrcadlového obrazu, mělo by být přebytečné rozptýlené světlo co nejvíce odstíněno před vstupem do pole pozorovacího zrcadla nebo do zobrazovací oblasti. Při pozorování přes okulár s objektivy s různým zvětšením lze clonu zorného pole upravit tak, aby vytvořilo dokovací nebo mírně odpovídající zrcadlové pole okuláru. Později; při mikrofotografii nebo digitálním CCD zobrazování lze zorné pole zmenšit podle rámečku hledáčku a zobrazovací oblasti CCD, ale nezmenšovat se příliš, aby došlo k oříznutí rohu fotografie. Při použití olejové čočky ji lze také řádně oddálit.
Nastavení číselné clony kondenzoru
Za prvé, rozsah numerické apertury (NA) kondenzorové čočky by měl být v zásadě roven hodnotě NA objektivu a měl by být označen stupnicí NA. Pro mikroskopickou kontrolu s velkým zvětšením je nutné navrch přidat olej. Funkcí aperturního kondenzoru je poskytovat efektivní zaostřené promítané světlo odpovídající numerické apertuře objektivu. Pokud je NA kondenzorové čočky nastavena větší než NA objektivu, část světla bude promarněna. Pokud je NA kondenzorové čočky nastavena příliš malá, promítané světlo bude nedostatečné a v důsledku změny výstupního úhlu bude část světla ozařovat preparát šikmo a bude se jevit jako difrakce. Zrcadlení, obojí snižuje rozlišení zrcadlení. Proto by měly být dodrženy určité odpovídající zásady nastavení. Empirická hodnota se má upravit v rámci 80--100 procent NA odpovídající čočky objektivu během kontroly mikroskopem. Doporučuje se nastavit ji na 60-80 procent nebo 70 procent, abyste během fotografování získali vhodnější kontrast a hloubku ostrosti. - 80 procent. To znamená, že pokaždé, když přepnete mezi objektivy s různým zvětšením, musíte provést odpovídající úpravy. V praxi můžete také provést jemné úpravy podle tloušťky vzorku a hloubky barvení.
Špatná korekce pokrytí, tloušťka standardního krycího skla je {{0}},17 mm a tloušťka podložního skla je 1.0 mm. V důsledku použití krycího skla nebo podložního skla, které nesplňuje normu, a nerovnoměrné tloušťky plátku a montážního prostředku dojde k rozdílu v pokrytí, což velmi ovlivní objektiv NA objektiv. kvalita zrcadlového obrazu. Za účelem nápravy slabého pokrytí je na čočce interferometrického objektivu 40x, 60x nebo 20x navržen korekční objímka (CC). Rozsah korekce je obecně 0.{8}}.23 mm a objektiv s dlouhou pracovní vzdáleností může dosáhnout 2,0 mm. Základy úpravy CC byste měli ovládat pečlivě, jinak to způsobí potíže, zvláště když předchozí experimentátor provedl kalibraci a pokrytí vzorku dalšího experimentátora je nekonzistentní. cesta je,
Nejprve vyberte CC a zarovnejte čáru hodnoty 0.17 s pozičním křížem a sledujte, zda lze zrcadlový obraz jasně zaostřit. Pokud to není příliš jasné, otáčejte CC kroužkem doleva a doprava, dokud zrcadlový obraz nedosáhne nejlepšího výsledku, a trvejte na každé výměně preparátu. Korekce pokrytí a úprava by měla být dokončena pokaždé, aby byla zajištěna kvalita mikroskopické kontroly.