Způsob výroby mikroskopických preparátů
Existují tři způsoby výroby mikroskopických preparátů:
1. Metoda stěru
Smear method je způsob přípravy, při kterém se materiál rovnoměrně rozprostře na sklíčko.
Nátěrové materiály zahrnují jednobuněčné organismy, drobné řasy, krev, bakteriální kultury, volné tkáně rostlin a zvířat, hnízda spermií, prašníky atd.
Při roztírání je třeba věnovat pozornost:
(1) Skluzavka musí být čistá.
(2) Skluzavka by měla být držena naplocho.
3) Nátěr musí být jednotný. Naneste kapku krycí kapaliny vpravo od středu sklíčka a dobře ji rozetřete ostřím pitevního nože nebo párátkem atd.
4) Povlak by měl být tenký. Použijte další sklíčko jako zatlačovač, jemně zatlačte zprava doleva po povrchu sklíčka kapkou aplikačního roztoku (úhel mezi dvěma sklíčky by měl být 30 stupňů až 45 stupňů) a naneste rovnoměrně tenkou vrstvu.
5) Fixace. Je-li nutná fixace, použijte chemický fixátor nebo desikační (bakteriální) fixaci.
6) Barvení. Na bakterie použijte methylenovou modř a na krev Rachelinu skvrnu. Barvicí roztok by měl pokrývat celý potažený povrch.
7) Opláchněte. Nasávejte na savý papír nebo pečte na sucho.
8) Zalepte fólii. Pro dlouhodobé skladování použijte kanadský stromový film.
2. Metoda lisování filmu
Metoda tlakového filmu je biologický materiál umístěný mezi podložní sklíčko a krycí fólii, při použití určitého tlaku dojde k odlisování tkáňových buněk způsobem přípravy.
(1) vzít materiál. Pozorování buněčného dělení, buněčného dělení by měly být vybrány bujné, čerstvé tkáňové buňky jako materiály. Jako jsou kořenové špičky, meristematická tkáň stonkových špiček, buňky kostní dřeně, prašníky (pylové mateřské buňky). Hnízdo spermií (spermatogonie) a tak dále.
(2) Fixace. Fixaci materiálu lze určit dle potřeby, ihned po odběru materiálu pozorováním tlakového filmu, nelze provést samostatnou fixní úpravu (a barvení synchronně); odběr materiálu není ihned po kontrole, materiál lze fixovat fixátorem (obecně fixativem acetátu alkoholu). Fixováno 2 ~ 24 hodin (v závislosti na materiálu) po umytí 95% etanolem, konzervováno v 70% etanolu, pohotovostní režim.
(3) Disociace. Buňky není snadné dispergovat materiál hydrolytickým separačním roztokem (jako je 1N HCl nebo roztok kyseliny chlorovodíkové a alkoholu), celkové ošetření 6 ~ 20 minut, po disociaci a opláchnutí vodou před barvením.
(4) Barvení. Existuje mnoho druhů skvrn. Pozorování chromozomů se běžně používá k barvení barvicím roztokem acetátu purpurové.
(5) Lisování filmu. Umístěte materiál na sklíčko, přidejte kapku vody nebo barvícího roztoku, přikryjte krycí sklíčko a palcem sklíčko jemně přitlačte.
(6) Pozorování. Po vylisování fólie je možné ji pozorovat pod mikroskopem.
