Jak číst výsledky fluorescenční mikroskopie pomocí tunelu k detekci apoptózy
1. Při pozorování výsledků věnujte pozornost třem bodům, metodě epiprojekce, rozlišení projekce a úpravě filtru. Konkrétně:
Metoda osvětlení je obvykle episkopická, to znamená, že zdroj světla je promítán na vzorek přes čočku objektivu;
Zdrojem světla je ultrafialové světlo, vlnová délka je kratší a rozlišení je vyšší než u běžných mikroskopů;
Existují dva speciální filtry, jeden před světelným zdrojem se používá k odfiltrování viditelného světla a jeden mezi okulárem a čočkou objektivu se používá k odfiltrování ultrafialových paprsků k ochraně lidských očí.
Za druhé, fluorescenční mikroskop používaný k měření apoptózy tunelem je také druh optického mikroskopu, hlavní rozdíl je v tom, že vlnové délky excitace obou jsou různé. To určuje rozdíl mezi fluorescenčním mikroskopem a běžným optickým mikroskopem z hlediska struktury a použití. Fluorescenční mikroskopie je základním nástrojem v imunofluorescenční cytochemii. Skládá se z hlavních komponent, jako je zdroj světla, systém filtračních desek a optický systém. Jedná se o použití určité vlnové délky světla k vybuzení vzorku, aby emitoval fluorescenci, a ke sledování fluorescenčního obrazu vzorku zesílením systému čočky objektivu a okuláru.
3. Fluorescenční potlačená filtrační deska pro měření apoptózy v tunelu Funkcí potlačené filtrační desky je zcela blokovat průchod excitačního světla a poskytovat fluorescenci v odpovídajícím rozsahu vlnových délek. Podle budicí filtrační desky se běžně používají následující tři typy lisovaných filtračních desek:
Filtrační deska pro lisování ultrafialového světla: Může procházet viditelným světlem a blokovat průchod ultrafialového světla. Lze kombinovat s UG-1 nebo UG-5. Běžně používané GG-3K430 nebo GG-6K460.
Filtrační deska pro potlačení fialového modrého světla: může propouštět světlo s vlnovou délkou nad 510 nm (zelená až červená) a lze ji kombinovat s BG-12. Obvykle se používá OG-4K510 nebo OG-1K530.
Filtrační deska lisující ultrafialové světlo: může propouštět světlo s vlnovou délkou nad 460nm (modrá až červená), lze ji kombinovat s BG-3, běžně používaným OG-11K470AK 490, K510.
