Jak si vybrat mezi inverzním mikroskopem a fluorescenčním mikroskopem?
V buněčných kulturách a souvisejících experimentech s deriváty je mikroskop velmi důležitým nástrojem. V současné době jsou na trhu různé druhy mikroskopů. Vybrat mikroskop, který vyhovuje potřebám a je použitelný, je výzva. Následuje seznámení s principy inverzních mikroskopů a fluorescenčních mikroskopů, abyste si mohli snadno vybrat.
Složení inverzního mikroskopu je stejné jako u běžného mikroskopu, obsahuje především tři části: mechanickou část, osvětlovací část a optickou část. Složení inverzního mikroskopu je stejné jako složení běžného svislého mikroskopu, kromě toho, že čočka objektivu a osvětlovací systém jsou obrácené, první je pod stolkem a druhý nad stolkem. Taková konstrukce může výrazně rozšířit účinnou vzdálenost mezi osvětlovacím koncentračním systémem a stolkem, což je výhodné pro umístění silnějších objektů, které mají být pozorovány, jako jsou kultivační misky a láhve na buněčné kultury (samozřejmě jsou k dispozici i podložní sklíčka atd.) , a zároveň vzdálenost mezi čočkou objektivu a materiálem Pracovní vzdálenost mezi nimi nemusí být příliš velká. Inverzní mikroskopy se používají k pozorování mikroorganismů, buněk, bakterií, tkáňových kultur, suspenzí, sedimentů atd. v lékařských a zdravotnických zařízeních, vysokých školách a výzkumných ústavech. Může nepřetržitě sledovat proces rozmnožování a dělení buněk, bakterií atd. v kultivačním médiu a může během toho pořizovat snímky jakékoli formy. Je široce používán v cytologii, parazitologii, onkologii, imunologii, genetickém inženýrství, průmyslové mikrobiologii, botanice a dalších oborech.
Fluorescenční mikroskopie se používá ke studiu absorpce a transportu látek v buňkách, distribuce a lokalizace chemických látek atd. Pro kontrolovaný objekt existují dva způsoby generování fluorescence: autofluorescence, která emituje fluorescenci přímo po ozáření ultrafialovým zářením. světlo; Některé látky v buňkách, jako je chlorofyl, po ozáření ultrafialovými paprsky produkují autofluorescenci; i když některé látky samy o sobě fluorescenci nemohou, mohou také emitovat sekundární fluorescenci poté, co byly obarveny fluorescenčními barvivy nebo fluorescenčními protilátkami po ozáření ultrafialovými paprsky. Fluorescenční mikroskop využívá bodový světelný zdroj s vysokou světelnou účinností k vyzařování světla o určité vlnové délce (ultrafialové světlo 365nm nebo purpurově modré světlo 420nm) přes filtrační systém jako excitační světlo a po excitaci fluorescenčních látek ve vzorku emitují fluorescenci různých barvy, pak se pozorování provádí pomocí zvětšení čočky objektivu a okuláru. Tímto způsobem, pod silným kontrastním pozadím, i když je fluorescence velmi slabá, je snadno identifikovatelná a má vysokou citlivost. Používá se především pro výzkum buněčné struktury a funkce a chemického složení.
Fluorescenční mikroskopy se dělí na transmisní typ a epi-ejekční typ, první je primitivnější a druhý pokročilejší. Základní struktura obou typů fluorescenčních mikroskopů je podobná, hlavní rozdíl je: excitační světlo transmisního typu prochází preparátem a celý preparát generuje fluorescenci, která pak vstupuje do čočky objektivu. Čím větší zvětšení, tím slabší fluorescence; excitační světlo epiemisního typu se promítá na povrch preparátu, povrch preparátu produkuje fluorescenci a fluorescence opět vstupuje do čočky objektivu. Čím větší zvětšení, tím silnější fluorescence, která je vhodná pro pozorování s velkým zvětšením. Mezi hlavní součásti fluorescenčního mikroskopu patří světelný zdroj rtuťové lampy, excitační filtrační deska, dichroické zrcadlo (typ epizody), lisovaná filtrační deska a kondenzátor tmavého pole (transmisní typ) atd. rtuťové výbojky produkují velké teplo, většina z nich je také vybavena filtry pohlcujícími teplo. Některé fluorescenční mikroskopy mají také objektivy s fázovým kontrastem a prstencové diafragmy, takže je možné pozorování ve fázovém kontrastu. Existují také fluorescenční mikroskopy, které přijímají obrácenou strukturu, další inverzní mikroskop a tak dále.
Kromě toho lze výše uvedené mikroskopy sestavit do digitálního mikroskopu instalací CCD, které převádí fyzický obraz pozorovaný mikroskopem na obraz v počítači pomocí digitálně-analogového převodu. Můžeme tedy změnit výzkum v mikroskopickém poli z tradičního běžného binokulárního pozorování na reprodukci na displeji a tím zlepšit efektivitu práce.
