Jak se liší fluorescenční mikroskopie od laserové konfokální mikroskopie
Fluorescenční mikroskop
1, fluorescenční mikroskop používá jako zdroj světla ultrafialové světlo, které se používá k ozařování zkoumaného předmětu tak, aby vyzařoval fluorescenci, a pak pozoruje tvar předmětu a jeho umístění pod mikroskopem. Fluorescenční mikroskop se používá ke studiu absorpce, transportu, distribuce a lokalizace chemických látek v buňkách. Některé látky v buňce, jako je chlorofyl, mohou po ozáření ultrafialovým světlem fluoreskovat; existují látky, které samy fluoreskovat nemohou, ale pokud jsou obarveny fluorescenčními barvivy nebo fluorescenčními protilátkami, mohou fluoreskovat i po ozáření ultrafialovým světlem a fluorescenční mikroskopie je jedním z nástrojů kvalitativního a kvantitativního výzkumu tohoto druhu látek.
2, princip fluorescenčního mikroskopu:
(A) světelný zdroj: světelný zdroj vyzařuje různé vlnové délky světla (od ultrafialového po infračervené).
(B) zdroj excitačního filtru: přes vzorek může produkovat fluorescenci o specifické vlnové délce světla, a přitom blokovat excitaci fluorescence zbytečného světla.
(C) Fluorescenční vzorek: obecně obarvený fluorochromem.
(D) Blokovací filtry: blokují excitační světlo, které není absorbováno vzorkem, aby selektivně propouštělo fluorescenci, a některé vlnové délky ve fluorescenci jsou také selektivně přenášeny. Mikroskop, který využívá ultrafialové světlo jako zdroj světla k tomu, aby ozařovaný objekt fluoreskoval. Elektronový mikroskop byl poprvé sestaven v roce 1931 v Berlíně v Německu firmou Knorr a Haroska. Tento mikroskop používá vysokorychlostní elektronový paprsek místo světelného paprsku. Protože vlnová délka proudu elektronů je mnohem kratší než světelná vlna, zvětšení elektronového mikroskopu může být až 800,000krát, rozlišení minimální hranice 0,2 nanometru . 1963 začal používat rastrovací elektronový mikroskop, který lze vidět na povrchu drobné struktury objektu.
3, rozsah použití: používá se ke zvětšení obrazu malých objektů. Obecně se používá v biologii, medicíně, mikroskopických částicích a dalších pozorováních.
Konfokální mikroskop
1, konfokální mikroskop v odraženém světle na vozovce plus poloodrazová poločočka, bude přes čočku odraženého světla složena do jiných směrů, ve svém ohnisku na přepážce s dírkou, otvor je umístěn v ohnisko, za ozvučnicí je trubice fotonásobiče. Lze si představit, že odražené světlo před a za ohniskem světla detektoru skrze tuto sadu konfokálního systému nebude schopno zaostřit na malý otvor, bude blokováno přepážkou. Fotometr tedy měří intenzitu odraženého světla v ohnisku.
2, princip: tradiční optický mikroskop využívá světelný zdroj pole, obraz každého bodu na preparátu bude rušen difrakcí nebo rozptylem světla ze sousedních bodů; laserový skenovací konfokální mikroskop využívá laserový paprsek procházející osvětlovací dírkou k vytvoření bodového zdroje světla na preparátu v ohniskové rovině skenování každého bodu na preparátu, vzorek je ozářen, při detekci dírky při zobrazení , detekcí dírky za fotonásobičem (PMT) nebo studeným elektrovazbovým zařízením (cCCD) bod po bodu nebo bod po bodu nebo bod po bodu se intenzita světla měří fotometrem. cCCD) přijímá bod po bodu nebo řádek po řádku a rychle vytváří fluorescenční obraz na obrazovce monitoru počítače. Osvětlovací dírka a detekční dírka vzhledem k ohniskové rovině čočky objektivu jsou sdružené, bod na ohniskové rovině se současně soustředí na osvětlovací dírku a emisní dírku, bod mimo ohniskovou rovinu nebude v detekční dírce při zobrazení, takže konfokální obraz je preparátem optického průřezu, překonávající nedostatky rozmazaných obrazů běžných mikroskopů.
3,Aplikační obory: lékařství, výzkum zvířat a rostlin, biochemie, bakteriologie, buněčná biologie, tkáňová embryologie, potravinářství, genetika, farmakologie, fyziologie, optika, patologie, botanika, neurověda, mořská biologie, nauka o materiálech, elektronická věda, mechanika, ropná geologie, mineralogie.
