Rozšíření výhod multipotonové laserové skenovací mikroskopie za zahrnutí
Laserové skenovací multifotonové mikroskop je významné zlepšení optické mikroskopie, které se projevuje hlavně ve schopnosti pozorovat hluboké struktury živých buněk, fixních buněk a tkání a získat jasné a ostré vícevrstvé struktury z-roviny, jmenovitě optickým složením, které lze použít k konstrukci trojrozměrných pevných struktur vzorků. Konfokální mikroskop používá zdroj laserového světla, který je rozšířen tak, aby naplnil celou ohniskovou rovinu objektivu objektivu, a poté se sblížil do velmi malých bodů na ohniskové rovině vzorku skrz systém objektivu objektivu objektivu. Podle numerické apertury objektivu objektivu je průměr jasného osvětlovacího bodu asi 0. 25-0. 8 μm a hloubka je asi 0. 5-1 5 μm. Velikost konfokálního bodu je určena návrhem mikroskopu, laserovou vlnovou délkou, objektivními charakteristikami, nastavením stavu skenovací jednotky a vlastnostmi vzorku. Rozsah osvětlení a hloubka polního mikroskopu jsou velké, zatímco osvětlení konfokálního mikroskopu je zaměřeno na ohnisko na ohniskovou rovinu. Základní výhodou konfokální mikroskopie je to, že může provádět jemné optické rozdělení na tlustých fluorescenčních vzorcích (až 5 0 μm nebo více), s tloušťkou přibližně 0,5 až 1,5 μm. Série obrázků optických řezů lze získat přesunutím vzorku nahoru a dolů pomocí krokového motoru osy z mikroskopu. Shromažďování informací o obrazu je řízeno v rovině * * bez rušení signálů emitovaných z jiných pozic na vzorku. Po odstranění vlivu fluorescence na pozadí a zvýšení poměru signál-šum se kontrast a rozlišení konfokálních obrazů významně zlepšuje ve srovnání s tradičními fluorescenčními obrazy v terénu. V mnoha exemplářích se složité strukturální komponenty prolínají k vytvoření komplexních systémů, ale jakmile lze shromáždit dostatek optických sekcí, můžeme použít software k jejich rekonstrukci ve třech rozměrech. Tato experimentální metoda byla v biologickém výzkumu široce používána k objasnění komplexních strukturálních a funkčních vztahů mezi buňkami nebo tkáními.
