Rozdíl mezi běžným světelným mikroskopem a fluorescenčním mikroskopem
Optický mikroskop: Je to optický přístroj, který využívá optické principy ke zvětšení a zobrazení drobných objektů, které lidské oko nedokáže rozlišit, aby lidé mohli extrahovat informace o mikrostruktuře.
Fluorescenční mikroskop: Fluorescenční mikroskop používá ultrafialové světlo jako zdroj světla k ozařování kontrolovaného objektu, aby emitoval fluorescenci, a pak pozoruje tvar a umístění objektu pod mikroskopem. Fluorescenční mikroskopie se používá ke studiu absorpce a transportu látek v buňkách, distribuce a lokalizace chemických látek atd. Některé látky v buňkách, např. chlorofyl, mohou po ozáření ultrafialovými paprsky fluoreskovat; ačkoli některé látky samy fluoreskovat nemohou, mohou fluoreskovat i po obarvení fluorescenčními barvivy nebo fluorescenčními protilátkami po ozáření ultrafialovými paprsky. Fluorescenční mikroskopie je jedním z nástrojů pro kvalitativní a kvantitativní výzkum takových látek.
Optický mikroskop se obecně skládá ze stolku, systému bodového osvětlení, čočky objektivu, okuláru a zaostřovacího mechanismu. Změnou metody osvětlení může systém bodového osvětlení získat různé metody pozorování, jako jsou body tmavých objektů na světlém pozadí (nazývané osvětlení světlého pole) nebo body jasných objektů na tmavém pozadí (nazývané osvětlení tmavého pole), aby bylo možné lépe objevit a pozorovat mikrostruktury v různých situacích.
Fluorescenční mikroskopy se liší od běžných mikroskopů následujícími způsoby:
1. Metoda osvětlení je obvykle episkopická, to znamená, že zdroj světla je promítán na vzorek přes čočku objektivu;
2. Světelným zdrojem je ultrafialové světlo, vlnová délka je kratší a rozlišení je vyšší než u běžných mikroskopů;
3. Existují dva speciální filtry, jeden před světelným zdrojem se používá k odfiltrování viditelného světla a jeden mezi okulárem a čočkou objektivu se používá k odfiltrování ultrafialových paprsků k ochraně lidských očí.
Fluorescenční mikroskop je také druh optického mikroskopu, hlavní rozdíl je v tom, že excitační vlnová délka obou je odlišná. To určuje rozdíl mezi fluorescenčním mikroskopem a běžným optickým mikroskopem z hlediska struktury a použití.
Fluorescenční mikroskopie je základním nástrojem v imunofluorescenční cytochemii. Skládá se z hlavních komponent, jako je zdroj světla, systém filtračních desek a optický systém. Jedná se o použití určité vlnové délky světla k vybuzení vzorku, aby emitoval fluorescenci, a ke sledování fluorescenčního obrazu vzorku zesílením systému čočky objektivu a okuláru.
